高纯度茶黄素的制备工艺及其作为制备抗流感病毒药物的应用

摘要

本发明涉及一种高纯度茶黄素的制备工艺，其制备过程为：将绿茶经乙酸乙酯提取后，进行茶多酚底物组成和浓度的调整，然后加入用新鲜茶叶制备的发酵酶，通入氧气进行搅拌发酵，然后经分离、浓缩、水洗、转溶、柱分离，浓缩，最后进行干燥、粉碎、过筛，从而得到合格的茶黄素产品。通过该工艺制得的本方法采用了调整酶底物技术，利用可控性纯有机相氧化发酵，可制得高纯度、具有特定化学组成的茶黄素产品，具有绿色环保，质量稳定，收率高，以及成本低等特点，并解决了传统的酯、水、渣混合相发酵后无法三相分离的问题，从而能够进行稳定可控的工艺化生产。制得的高纯度茶黄素应用于制备抗流感病毒药物。

主权项

一种高纯度茶黄素的制备工艺，其特征在于：所述工艺包括、但不限于如下步骤：a、发酵原液的制备：将绿茶加入到提取器中，然后加入有机溶剂，在10℃～90℃下搅拌提取10‑120min，出料，然后再加入有机溶剂同法再提取一次，合并提取液，浓缩提取液至含固率为0.5％～5％质量比；所述有机溶剂包括酯类、醇类、酮类和/或醚类；其中所述酯类包括乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯和/或乙酸异丙酯；所述醇类包括乙醇、丙醇和/或异丙醇；所述酮类包括丙酮和/或丁酮；所述醚类包括乙醚、丙醚和/或甲基叔丁醚；b、将a步骤的浓缩液加入到水洗器中进行水洗，将水洗后的浓缩液，冷却至室温作为发酵原液备用；c、发酵酶的制备：将新鲜茶叶用纯水或浓度为0.01％～1％的柠檬酸水溶液润湿，经冷冻，粉碎处理后作为发酵酶备用；d、发酵：将上述b步骤中的发酵原液加入到发酵器中，再加入c步骤中的发酵酶，均匀通入气体进行搅拌发酵，温度控制在20℃～60℃，其中：发酵原液与酶的重量比为5∶1～40∶1；e、分离：将d步骤处理过的发酵液通过滤网分离成滤液和滤渣两部分；f、浓缩：将e步骤分离得到的滤液进行控温浓缩，至含固率为5％～30％；g、水洗：将f步骤中的浓缩液置于水洗器中，加入酸性水溶液，搅拌混合进行水洗，然后静置，分层后分去下层水相，同法水洗1～20次，其中，每次加入的酸性水溶液与浓缩液的体积比为0.1～20∶1，水洗后分别收集有机相和水相，水相经浓缩干燥后得副产品，有机相留作备用；h、转溶：将g步骤中的有机相中加入纯水，其中纯水的加入量与有机相中发酵液的加入量的重量比为1～1∶50，然后进行控温浓缩；i、柱分离：将上述h步骤中转溶后的茶黄素水溶液冷却至室温，上层析柱，上柱完毕后，进行水洗，解吸，分级收集，收集其中富集TF2a，TF2b，TF3的茶黄素的解析液进行下步处理，其余部分解析液作为副产品；上述柱分离过程中，工艺参数为：树脂为大孔吸附树脂；装柱径高比为1∶4至1∶25；上柱量以上柱流出液中检测出有TF2a为准；水洗溶剂为5％～40％质量比的乙醇水溶液，水洗流出速度为0.5～5BV/H；解吸溶剂为20％～95％质量比的乙醇水溶液，解吸流出速度为0.5～5BV/H；整个工艺操作过程操制温度为0～60℃；j、浓缩：将上述i步骤中收集的富含TF2a，TF2b，TF3的茶黄素的解析液通过减压浓缩回收溶剂或通过反渗透浓缩回收溶剂；回收溶剂后将浓缩液冷却至30℃～60℃，过滤，收集滤液，再进一步浓缩，将溶液的含固率控制为10％～80％质量比；k、干燥：将上述j步骤中的最终浓缩液进行干燥，粉碎，过筛后得到合格的茶黄素产品。