特异性免疫核糖核酸的制备及应用

摘要

本发明公开了一种特异性免疫核糖核酸(iRNA)的制备及应用，属生物医药技术领域。该方法用国家标准病原体毒株接种易感鸡胚胎而制得免疫原(疫苗)，然后按程序单一或联合免疫健康禽类，收集其健康的脾脏、肝脏等脏器，经过粗提、精制，即由脏器中获取针对禽类各种疾病的特异性免疫核糖核酸。本发明制备的特异性免疫核糖核酸使用后具有疗效显著、作用迅速、无毒副作用的特点，容易保存，便于运输，生产工艺简单，适合于工业化生产。

主权项

特异性免疫核糖核酸的制备及应用，其特征在于：(1)、免疫原(疫苗)的制备：用国家标准病原体毒株接种易感鸡胚胎，收获感染胚液，经提纯、浓缩、灭活，加MAC进口佐剂乳化而成制得免疫原(疫苗)，然后按程序单一或联合免疫健康禽类；用鸡传染性新城疫(副粘病毒)疫苗免疫健康鸡群，皮下多点注射，每鸡1～5ml；在首次免疫后的第7～20天进行强化免疫，肌肉注射每鸡1.5～3ml；在强化免疫后的第7～20天进行再强化免疫，肌肉注射每鸡1.5～3ml；(2)、特异性免疫核糖核酸的制备：将上述经免疫的鸡养7～10天后屠宰，取脾脏、肝脏、胰脏或淋巴结等脏器去掉结缔组织及被膜，用生理盐水洗净、切碎，洗去血液并挤干；每200g组织加100～300ml盐水，置高速组织捣碎机中制成匀浆；向上述匀浆中加入苯酚溶液及0.1％～1％SDS，混匀，置30～70℃水浴振荡30min并置冰浴冷却，离心，取上清液置冰浴中；在上清中加入一半量的苯酚溶液，室温下剧烈振荡，离心，取水相；加2～3倍体积90％～95％酒精，置冰箱8小时，离心，弃上清，沉淀物即为要制备的特异性免疫核糖核酸。