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Reactivo que no contribuye a la fluorescencia de fondo pero que puede evitar por lo menos una manifestación del cebado defectuoso en una amplificación mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), para producir por lo menos un producto de ADN amplificado cuando es añadido a una concentración no superior a 650 nM a una mezcla de amplificación por PCR que incluye 1,25 unidades de una ADN polimerasa termoestable por 25 μl de mezcla de reacción, siendo dicho reactivo un oligonucleótido no extensible que presenta un extremo 3' y una estructura de tallo-bucle, que no es una sonda de hibridación para dicho por lo menos un producto de ADN amplificado, que presenta un tallo que comprende una región de doble cadena que presenta una longitud superior a seis nucleótidos, y un extremo alejado del bucle que comprende un nucleótido 3' y un nucleótido 5', presentando dicho tallo una temperatura de fusión del tallo (Tm) calculada inferior a 94ºC, en el que: (a) el extremo 3' no es extensible por dicha ADN polimerasa, y (b) dicho extremo de tallo resulta estabilizado por unos medios no fluorescentes seleccionados de entre el grupo constituido por grupos no fluorescentes inhibidores de fluoróforo unidos covalentemente a los nucleótidos 3' y 5' de dicho extremo del tallo y nucleótidos no naturales que se unen más fuertemente que un híbrido ADN-ADN natural al extremo del tallo.
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