以幼花瓣为外植体的君子兰离体快速繁殖方法

摘要

本发明属于花卉繁殖方法，具体涉及花卉的无性快速繁殖方法。本发明采用外植体接种及愈伤组织诱导、不定芽的诱导、根的诱导、再生植株移栽等技术，使君子兰在相对短的时间内大量产生基因背景完全相同、株型统一的再生植株。以大花君子兰幼花序(青苞)的花瓣基部为外植体，脱分化率及分化率均可达80％以上。由一块外植体诱导的愈伤组织经反复继代可分化出700株丛生芽，丛生芽表型统一。丛生芽生根率可达100％，在适宜环境下移栽成活率达100％。

主权项

以幼花瓣为外植体的君子兰离体快速繁殖方法，其特征是具体步骤如下：1).外植体接种及愈伤组织诱导：将幼花序花苞从子房下端剪开取下，将完整或上端剪开的花苞放入无菌超净台中，用体积比75％酒精浸泡30‑60秒，用质量体积比0.1‑0.2％的升汞溶液浸泡3‑10分钟，无菌水冲洗3‑5遍；将花苞从子房最上部切开，然后将花苞上部大部分切掉，剩余中部纵切两刀，接种在含6‑BA 0.2mg/L、2，4‑D 0.1‑0.5mg/L、质量体积比3.0‑3.5％蔗糖的MS培养基上，20℃‑30℃每天40W日光灯照射2‑4小时，30‑50天继代一次，待长出黄绿色愈伤时即诱导分化；2).不定芽的诱导：将黄绿色的愈伤转接到诱导分化培养基：MS+6‑BA 0.5‑1.0mg/L+2，4‑D 0.1‑0.2mg/L+3‑3.5％蔗糖，30‑50天继代一次，20℃‑30℃每天光照8‑10小时，该愈伤分化能力持续一年以上，从一块愈伤经反复继代分化出700多株再生苗；3).根的诱导：再生植株转到1/2MS+NAA 0‑2mg/L+蔗糖2％的生根培养基上，20℃‑30℃每天光照10‑12小时；4).再生植株移栽：植株生根后即移栽，腐殖土121℃灭菌15‑60分钟，移栽前将植株上的琼脂及杂物冲洗干净，3‑15天浇一次透水即成活。