食源性致病菌多重扩增内标序列及其制备方法

摘要

一种检疫技术领域的食源性致病菌PCR检测中的多重扩增内标序列及其制备方法；所述食源性致病菌PCR检测中的多重扩增内标序列的碱基序列如下：1054F--15bp--hlyAF--15bp--PrsF--15bp--PSF--15bp--SA1F--扩增内标序列--SA1R--15bp--hlyAR--15bp--PSR---15bp--PrsR--15bp--1054R；所述多重扩增内标序列的制备方法包括如下步骤：随机重排SEQ ID NO：1所示的碱基序列，得到相应的核酸，选取与所要检测的五种目的基因无同源性的核酸作为扩增内标序列；随机重排碱基序列ATTTCCAAGGTGAGC，选择任一序列作为长度为15bp的序列；采用常规多重扩增内标构建方法，利用步骤一所得的扩增内标序列、长度为15bp的序列以及碱基序列如SEQ ID NO：8～17所示的10条序列构建得到多重扩增内标。使用本发明的多重扩增内标可使PCR检测结果能指示假阴性的发生，提高PCR检测的准确率。

主权项

一种食源性致病菌PCR检测中的多重扩增内标序列，其特征在于，该序列的碱基序列如下：1054F‑‑15bp‑‑hlyAF‑‑15bp‑‑PrsF‑‑15bp‑‑PSF‑‑15bp‑‑SA1F‑‑扩增内标序列‑‑SA1R‑‑15bp‑‑hlyAR‑‑15bp‑‑PSR‑‑‑15bp‑‑PrsR‑‑15bp‑‑1054R；其中，所述1054F的碱基序列如SEQ ID NO：8所示；所述1054R的碱基序列如SEQ ID NO：9所示；所述hlyAF的碱基序列如SEQ ID NO：10所示；所述hlyAR的碱基序列如SEQ ID NO：11所示；所述PrsF的碱基序列如SEQ ID NO：12所示；所述PrsR的碱基序列如SEQ ID NO：13所示；所述PSF的碱基序列如SEQ ID NO：14所示；所述PSR的碱基序列如SEQ ID NO：15所示；所述SA1F的碱基序列如SEQ ID NO：16所示；所述SA1R的碱基序列如SEQ ID NO：17所示；所述15bp为由如SEQ ID NO：18所示的的碱基序列随机重排后得到的任一序列；所述多重扩增内标序列的碱基序列如SEQ ID NO：2所示。