一种评价添加剂对烟草特有亚硝胺抑制作用的方法

摘要

一种评价添加剂对烟草特有亚硝胺抑制作用的方法，该方法包括以下步骤：a.空白体系反应，即将烟碱与亚硝酸盐按摩尔比1∶1-5混合于缓冲溶液中，在一定条件下反应；b.抑制体系反应，即将烟碱与亚硝酸盐按a步骤相同比例混合，加入一定量添加剂后，按a步骤相同缓冲体系、相同温度及时间进行反应；c.分别萃取分离，并利用GC-TEA法分别测定空白体系与抑制体系中TSNAs含量，比较二者差别，对添加剂的抑制效果进行评价。本发明的突出特点在于：建立了一种快速、准确、科学的评价方法，通过具体测定数据，客观评价各种添加剂对TSNAs生成的抑制作用，从而对拟施加于卷烟的不同添加剂进行初步筛选。

主权项

一种评价添加剂对烟草特有亚硝胺抑制作用的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：a.空白体系反应，即将烟碱‑乙醇溶液与亚硝酸盐‑水溶液按烟碱∶亚硝酸盐摩尔比1∶1‑5混合于5‑50mL pH3‑7缓冲溶液中，于50‑120℃加热搅拌反应1‑10h，所述烟碱‑乙醇溶液中烟碱浓度为0.2‑2mmol/L，亚硝酸盐‑水溶液中亚硝酸盐的浓度为5‑20％，w/w，缓冲溶液为柠檬酸‑磷酸氢二钠溶液；b.抑制体系反应，即将烟碱‑乙醇溶液与亚硝酸盐‑水溶液按a步骤相同比例混合，加入一定量添加剂后，按a步骤相同缓冲体系、相同温度及时间进行反应，所述添加剂的加入量根据卷烟中实际添加量进行折算；c.分别萃取分离，萃取分离过程包括用20mL×3的二氯甲烷萃取反应液，无水硫酸钠干燥；过滤；加入内标N‑戊基‑3‑甲基吡啶基亚硝胺后浓缩，定容到1mL，并利用GC‑TEA法分别测定空白体系与抑制体系中烟草特有亚硝胺NNN与NNK的含量，比较二者差别，对添加剂的抑制效果进行评价，所述GC‑TEA法中毛细管气相色谱条件：色谱柱HP‑50+30m×0.53mm×1μm；柱前保护柱为1m×0.53mm的空柱管；程序升温，初始温度150℃，保持2min，2℃/min升至175℃，保持8min，3℃/min升至230℃，30℃/min升至250℃，保持5min；进样口温度230℃；载气为氦气，恒流速10mL/min；进样量3μL，不分流，不分流时间0.75min；吹扫流量50mL/min；所述GC‑TEA法中热能分析仪条件为：热裂解器温度500℃，气相接口温度250℃，氧气流速18mL/min。