鱼类哈维氏弧菌PCR快速检测试剂盒及使用方法

摘要

本发明公开一种鱼类哈维氏弧菌PCR快速检测试剂盒及使用方法。该试剂盒包括7种试剂：裂解液、PCR反应液、dNTP混合物、Taq酶液、引物对、阳性对照及阴性对照等。哈维氏弧菌DNA的特异引物对：5’-GAAAACCAATACATCGCTCTGACT-3’和5’-TTGACAATTGATTCGTACTTTCTAGC-3’。本发明的突出优点是仅需一对哈维氏弧菌DNA的特异引物，即可对不同样品中哈维氏弧菌进行检测或监控，方法简便、快速、灵敏、应用范围广。不但能对养殖鱼类疾病进行快速诊断，而且可为海水水质监控以及海产品质量控制提供最简便方法。

主权项

一种鱼类哈维氏弧菌PCR快速检测试剂盒，其特征在于包括以下7种试剂：(1)裂解液：含有胰蛋白酶、Tris、EDTA，pH为7.5‑8.5，其浓度分别为1‑10mg/mL，10‑50mmol/L，1‑10mmol/L；(2)PCR反应液：含dNTP和MgCL2溶液；dATP，dTTP，dCTP和dGTP的四种混合物dNTP，其中每种浓度2.0‑3.0mmol/L；浓度为20‑30mmol/L的MgCL2溶液；(3)Taq酶液：3U/μL.；(4)引物对：上游引物：5’‑GAAAACCAATACATCGCTCTGACT‑3’，10‑20μmol/L下游引物：5’‑TTGACAATTGATTCGTACTTTCTAGC‑3’，10‑20μmol/L(5)灭菌去离子水(6)阳性对照(7)阴性对照。