高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A₁用于大豆毛油脱胶的方法

摘要

本发明是为了解决现有的酶脱胶法存在温度和pH不易控制而导致大豆油脱胶效果差以及现有的酶脱胶法成本高和自然酶混溶在反应体系中不仅不易分离回收，而且酶的制取一般较困难，且成本高昂，难以反复或连续使用等问题，而提出了一种高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A1用于大豆毛油脱胶的方法，包括高碘酸钠的氧化活化、磷脂酶A1的固定化、大豆毛油脱胶的过程。本发明将高碘酸钠氧化法固定化的磷脂酶A1应用在大豆毛油脱胶中，温度和pH值得到可控，从而加大了酶的最适反应条件范围，使酶可以在更加宽泛的范围中保持较好的活力，本发明可进行大规模工业操作。

主权项

一种高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A1用于大豆毛油脱胶的方法，其特征在于通过以下步骤实现：一、磷脂酶A1的固定化：取一张含有羟基的膜悬浮于0.01～0.3mol/L的高碘酸钠溶液中，室温下置于摇床中活化30～100min，取出立即用去离子水洗至中性，吸干水分；然后将含有羟基的膜置于平皿中，在5～35℃条件下，分别与0.01～0.09g/mL的酶液和pH为5.8的磷酸盐缓冲液，加入体积浓度0.05～0.6％戊二醛进行交联反应1～6h，交联反应结束后将所述含有羟基的膜悬浮于体积浓度为1％的氢硼化钠溶液中，4℃反应20～40min，然后用HAI溶液、KCl溶液和水分别洗涤三次，晾干剪碎即得固定化磷脂酶A1；二、大豆毛油脱胶：先经水化脱胶法去除大豆油中的水化磷脂，然后向经过处理的大豆油中加入质量浓度为40％～45％的柠檬酸溶液并以1000～1500r/min的速度搅拌5～20min，再向经过处理的大豆油中添加质量浓度为4％的NaOH溶液并不断进行搅拌直至大豆油的pH值在4.0～6.0之间时停止添加NaOH溶液；三、在45～55℃条件下向调整好pH值的大豆油中加入其质量的0.1％～0.5％的固定化磷脂酶A1；四、对加入固定化磷脂酶A1的大豆油以40～100r/min的速度搅拌2～10h，然后对加入固定化磷脂酶A1的大豆油以3000～3500r/min的速度离心5～20min，去除杂质，即可。