小麦条锈菌与叶锈菌的复合PCR检测鉴定试剂盒

摘要

小麦条锈菌与叶锈菌的复合PCR检测鉴定试剂盒，属于生物技术、农作物病害防治和植物检疫技术领域。该试剂盒利用源自真菌β—微管蛋白基因保守序列和小麦条锈菌、叶锈菌特异序列的三条引物，在一次PCR反应中，同时检测小麦条锈菌171bp、叶锈菌226bp的特异性基因组DNA序列。是对小麦条锈菌和叶锈菌特异性引物检测方法的补充和改进，也适用于病害症状显现之前、受侵染小麦叶片内条锈菌与叶锈菌的诊断检测。本试剂盒采用复合PCR技术，在PCR—SMART反应液中，三条引物同时扩增，提高了检测的准确性，节约了检测时间，且操作简便，可供我国植保、植检部门推广应用。

主权项

一种小麦条锈菌与叶锈菌的复合PCR检测鉴定试剂盒，其特征在于该试剂盒由以下几种试剂组成：(1)PCR‑SMART反应液：其中含有两对小麦锈菌不同种的PCR专用引物，第一对引物序列为：引物A：5’‑ACCCACAACCGCCAACATGCGTGA‑3’，引物B：5’‑CTCATCAGGTAGCCCATCGT‑3’；第二对引物序列为：引物A：5’‑ACCCACAACCGCCAACATGCGTGA‑3’引物C：5’‑TTAAGACTACCGGTGTGAAC‑3’，(2)Tap酶；(3)条锈菌阳性对照；(4)叶锈菌阳性对照；(5)分子量标记；(6)超纯水；(7)凝胶上样缓冲液。