一种植物雌激素活性成分筛选的构建方法

摘要

本发明涉及一种植物雌激素活性成分筛选方法，该方法以共转染为基础，将携带外源人雌激素受体基因的表达载体和携带雌激素应答序列(3×ERE)的荧光素酶报告基因载体按比例转染人乳腺癌MCF-7细胞，再加入植物雌激素待检测样品，检测荧光素酶的表达，荧光素酶的表达受ERE的调控，即可筛选到植物雌激素活性成分。该方法对于植物雌激素活性成分的筛选，具有较高的特异性和灵敏性，可作为植物雌激素活性成分筛选模型广泛使用。本发明所述方法简便、灵敏、特异性好、用药量低，可用于植物雌激素活性成分的高通量筛选，有效地解决了现有植物雌激素活性成分筛选方法药品用量大、成本高、操作复杂、结果重复性差、难以满足高通量筛选等不足。

主权项

一种植物雌激素活性成分筛选的构建方法，其特征在于按下列步骤进行：a、利用基因工程技术构建pERα表达载体；b、将报告基因载体pERE‑luc与雌激素受体表达载体pERα以1∶10‑10∶1的质量比共转染人乳腺癌MCF‑7细胞；c、转染24h后，加入植物雌激素待检测样品，24‑48h时检测荧光素酶的表达，即可筛选到植物雌激素活性成分。