发明名称 |
一种酿酒酵母gsh1缺失突变株的构建方法及应用 |
摘要 |
本发明公开了一种酿酒酵母gsh1缺失突变株的构建方法及应用,步骤是:A、获得Δgsh1突变株:酿酒酵母基因同源重组敲除原理、引物设计、敲除片段转化方法按照文献所描述的方法进行(Yeast,1998,14:953-962),该方法是目前酿酒酵母中基因敲除的通用方法;依据酿酒酵母gsh1基因序列设计引物:上游引物P1和下游引物P2;利用上游引物P1和下游引物P2对质粒pFA6a-Kan MX6进行PCR扩增,获得含酿酒酵母gsh1基因上下游序列的敲除片段;通过醋酸锂/PEG的转化方法将敲除片段导入酿酒酵母BY47421菌株细胞,筛选得到酿酒酵母的Δgsh1突变株YJL101C。利用微生物遗传学方法构建酿酒酵母细胞Δgsh1突变株,再利用突变株进行氯化镉等重金属细胞毒性的检测,以提高细胞毒性检测灵敏度,方法易行,操作简便。 |
申请公布号 |
CN102296033A |
申请公布日期 |
2011.12.28 |
申请号 |
CN201110109262.8 |
申请日期 |
2011.04.26 |
申请人 |
武汉大学 |
发明人 |
谢志雄;庞代文;李勇 |
分类号 |
C12N1/18(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I;C12R1/865(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/18(2006.01)I |
代理机构 |
武汉宇晨专利事务所 42001 |
代理人 |
王敏锋 |
主权项 |
一种酿酒酵母的gshl缺失突变株,其特征在于:酿酒酵母的Δgshl突变株YJL101C(Saccharomyces cerevisiae YJL101C),CCTCC No:M 2011130。 |
地址 |
430071 湖北省武汉市武昌珞珈山 |