红树莓的组织培养与快速繁殖方法

摘要

本发明提供一种红树莓的组织培养与快速繁殖方法，它以红树莓的茎尖或带芽茎段作为外植体，在诱导培养基中直接诱导培养产生芽丛，再在增殖培养基中交替进行增殖培养出所需量的芽丛后，经生根培养后，直接放入育苗袋移栽，获得了红树莓种苗。本发明之方法高效、快速，无需通过采集大量外植体来获得无菌苗，通过各培养阶段的激素调节，采取激素混用和轮用，达到提高增殖率和减少变异的目的，省去了组培苗营养钵移栽的环节，提高移栽成活率，成活种苗便于运输，种植时，摘去育苗袋后直接栽种即可，完全实现了红树莓优良品种种苗的规模化和标准化生产。

主权项

一种红树莓的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于包括下列工艺步骤：A、将经过消毒灭菌处理过的红树莓外植体——即红树莓的茎尖或带芽茎段，接种到下列诱导培养基中：MS培养基糖              30～40g/L琼脂            5～7g/LBA              0.5～1.5mg/LNAA             0.1～0.3mg/LpH              5.8～6.0在光照强度为1500～2000lx，温度为20～27℃，光周期为8～10h/d培养条件下，培养至外植体萌发叶分化成芽丛，切下芽丛，而外植体继续在诱导培养基中，反复诱导培养至长出新芽丛，以25～35天为周期转接继代一次；B、将A步骤切下的芽丛依次转接至下列增殖培养基I和II中：增殖培养基I：MS培养基糖              30～40g/L琼脂            5～7g/LBA              0.5～1.0mg/LNAA             0.2～0.3mg/LpH              5.8～6.0增殖培养基II：MS培养基糖              30～40g/L琼脂            5～7g/LBA              1.0～1.5mg/LNAA             0.1～0.2mg/LpH              5.8～6.0并在光照强度为1500～2000lx，温度为20～27℃，光周期为8～10h/d培养条件下，进行增殖培养，且在增殖培养基I和II中，分别每25～35天继代一次，得增殖倍数为2.5～3的芽丛，如此反复进行增殖培养至所需数量的芽丛，并使芽丛长成2～3节、高2～3cm的芽苗，切下；C、将B步骤切下的芽苗分成单株，接种到下列生根培养基中，在光照强度为1500～2000lx，温度为20～27℃，光周期为8～10h/d培养条件下，生根培养至芽苗长大并生根：1/2MS培养基糖            30～40g/L琼脂          5～7g/LIAA           0.1～0.2mg/LNAA           0.3～0.5mg/LpH            5.8～6.0；D、将上述C步骤的生根苗移至室外散射光下锻炼6～10天后，取出生根苗，用清水将苗上培养基洗净，放入质量浓度为0.1％的多菌灵溶液中消毒1～2分钟，移栽至装有下列基质的育苗袋中：腐殖土∶红土＝1∶1质量比的基质中，该基质中混合有质量比为4～7％的珍珠岩，即得红树莓种苗。