发明名称 一种脑肿瘤干细胞分离方法
摘要 本发明提供了一种脑肿瘤干细胞分离方法,包括的步骤有:获取原代脑肿瘤细胞;原代脑肿瘤细胞的消化传代:将所述脑肿瘤细胞接种至第一无血清干细胞培养基中,再加入MG-132进行培养后,用第一无血清干细胞培养基进行换液,然后加入多烯紫杉醇和阿霉素进行二次培养,获得原代脑肿瘤球细胞;MG-132在第一无血清干细胞培养基中的含量为10~25μmol/L;原代脑肿瘤球细胞的收集传代:将所述原代脑肿瘤球细胞洗涤收集,再接种至第二无血清干细胞培养基中进行培养传代,获得所述的脑肿瘤干细胞;其中,所述第二无血清干细胞培养基中含有ESGRO。该方法能抑制脑肿瘤干细胞的分化并促进其增殖分裂,获得大量高纯度脑肿瘤干细胞。
申请公布号 CN102286430A 申请公布日期 2011.12.21
申请号 CN201110269217.9 申请日期 2011.09.13
申请人 深圳市博泰生物医学科技发展有限公司;刘韬 发明人 刘韬
分类号 C12N5/095(2010.01)I 主分类号 C12N5/095(2010.01)I
代理机构 深圳中一专利商标事务所 44237 代理人 张全文
主权项 一种脑肿瘤干细胞分离方法,包括如下步骤:获取原代脑肿瘤细胞;原代脑肿瘤细胞的消化传代:将所述脑肿瘤细胞接种至第一无血清干细胞培养基中,再加入蛋白酶体抑制剂MG‑132进行培养后,用第一无血清干细胞培养基进行换液,然后加入多烯紫杉醇和阿霉素进行二次培养,获得原代脑肿瘤球细胞;蛋白酶体抑制剂MG‑132在第一无血清干细胞培养基中的含量为10~25μmol/L;原代脑肿瘤球细胞的收集传代:将所述原代脑肿瘤球细胞洗涤收集,再接种至第二无血清干细胞培养基中进行培养传代,获得所述的脑肿瘤干细胞;其中,所述第二无血清干细胞培养基中含有重组白血病抑制因子ESGRO。
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