兰花无菌播种和试管成苗繁殖方法及所采用的广谱培养基

摘要

本发明公开了兰花无菌播种和试管成苗的繁殖方法及所采用的广谱培养基。本方法选取生长健壮的兰花母株，于开花时进行人工授粉，将授粉后发育至基本成熟而未开裂时的果实做为外植体，或从野外采取基本成熟而未开裂的兰花果实为外植体，经过无菌播种、种子萌发、壮苗培养和试管苗移栽等繁殖步骤。分别采用专门的配制的培养基进行无菌播种和种子萌发获得小植株，再将小植株经在专门配制的壮苗培养基上培养，出瓶前在温室中的自然光照下炼苗7～14天，取出试管苗，洗掉根部培养基，栽入树皮、兰石和泥炭的混合基质中，进一步栽培成种苗。本发明具有种子的萌发率高、成苗快、种苗品质好、成本低廉等特点，能在短期内获得大量的试管苗，成苗的移栽成活率可保持在90％以上。能为兰花的种苗生产提供一条有效的途径。

主权项

兰花无菌播种和试管成苗的繁殖方法及所采用的广谱培养基，其特征在于包括以下步骤：(1)材料：选取生长健壮的兰花母株，于开花时进行人工授粉，将授粉后发育至基本成熟而未开裂时的果实做为外植体用于播种，或从野外采取基本成熟而未开裂的兰花果实为外植体用于播种；(2)无菌播种：将外植体依次用酒精浸泡，升汞溶液消毒，无菌水漂洗后切开，将粉末状胚接种到种子萌发培养基，种子萌发形成原球茎，随后转移到同样的培养基中进一步形成小苗，所述的种子萌发培养基每升含花宝1号1～2g，蛋白胨0.5～2g，椰子汁50～100mL，活性炭0.5～1g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素(VB1)0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，萘乙酸(NAA)0.2～2mg，蔗糖15～30g，琼脂6～7g，pH 5.4‑5.6；(3)壮苗培养：将在上述无菌播种培养所得的高1～1.5厘米高的小植株转移到壮苗培养基上培养，所述的壮苗培养基每升含花宝1号1～2g，花宝2号1～2g，蛋白胨0.5～3g，萘乙酸(NAA)0.5‑3mg、香蕉匀浆50‑100g、活性炭0.5～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素(VB1)0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，蔗糖20～30g，琼脂6～7g，pH 5.4‑5.6；(4)试管苗移栽：将培养瓶中的试管苗转移到自然光下炼苗，然后将其从培养瓶中取出，洗净根部的培养基，移入兰石∶树皮∶泥炭为2∶0.5～2∶0.5～2的混合基质中；上述步骤(2)～(3)中培养条件为培养温度24‑28℃，光照度1500～2000lx，光照12‑16小时/天。