介导外源基因在哺乳动物细胞高效表达的载体及其应用

摘要

本发明公开了介导外源基因在哺乳动物细胞高效表达的组合载体，该组合载体包括外源基因高效表达载体pATEW和人工转录因子表达载体pcDNA3.1(+)/Hy/GVP4。外源基因高效表达载体pATEW组合了人β-globin MAR序列、hEF-1α基因转录调控序列、转录后调控元件WPRE等基因表达调控元件和人工转录因子结合位点序列；人工转录因子表达载体pcDNA3.1(+)/Hy/GVP4表达由VP16中12肽(DALDDFDLDMLG)的4个串联重复作为人工转录因子的功能结构域和SV40的核定位序列两部分连接而成的人工转录因子GVP4。将携带外源基因的pATEW和pcDNA3.1(+)/Hy/GVP4共转染哺乳动物细胞，即可实现外源基因在哺乳动物细胞中的高效表达。

主权项

一种介导外源基因在哺乳动物细胞高效表达的载体，其特征在于：所述载体包括人β‑globin MAR、hEF‑1α基因转录调控元件、人工转录因子结合位点、人工转录因子GVP4和转录后调控元件WPRE；所述人β‑globin MAR的序列如SEQ ID No.1所示；所述hEF‑1α基因转录调控元件包括如SEQ ID No.2所示的hEF‑1α5’端的核苷酸序列和SEQ ID No.3所示的hEF‑1α3’端的核苷酸序列；所述人工转录因子结合位点的序列如SEQ ID No.4所示；所述转录后调控元件WPRE的序列如SEQ ID No.5所示；所述人工转录因子GVP4的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。