发明名称 细菌检测器具、细菌检测方法及细菌检测套组
摘要
申请公布号 TWI352739 申请公布日期 2011.11.21
申请号 TW094126488 申请日期 2005.08.04
申请人 三得利控股股份有限公司 发明人 山中实喜子;守屋彰悟;小佐野薰;桶川高史
分类号 C12Q1/68 主分类号 C12Q1/68
代理机构 代理人 洪武雄 台北市中正区博爱路35号9楼;陈昭诚 台北市中正区博爱路35号9楼
主权项 一种细菌检测器具,其系用于在被检测试料中检测与监定细菌,该细菌检测器具包括:含有序列编号1所示之核苷酸序列的寡核苷酸探针,选自含有序列编号9、10或11所示之核苷酸序列之寡核苷酸探针所成群组之一种或多种寡核苷酸探针,以及选自含有序列编号2至8、12至40、43至56或57所示之核苷酸序列之寡核苷酸探针所成群组之一种或多种寡核苷酸探针,用以检测细菌,其中该寡核苷酸系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测属于芽孢杆菌(i>Bacillus/i>)属细菌之含有序列编号2或3所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测短芽孢杆菌(i>Brevibacillus/i>)属细菌之含有序列编号4所示之核苷酸序列之寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测脂环酸芽孢杆菌(i>Alicyclobacillus/i>)属细菌之含有序列编号5所示之核苷酸序列之寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测硫胺素芽孢杆菌(i>Aneurinibacillus/i>)属细菌之含有序列编号6所示之核苷酸序列之寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测嗜热芽孢杆菌(i>Geobacillus/i>)属细菌之含有序列编号7所示之核苷酸序列之寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测类芽孢杆菌(i>Paenibacillus/i>)属细菌之含有序列编号3或8所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测蜡状芽孢杆菌(i>Bacillus cereus/i>)细菌之含有序列编号9、10或11所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测凝结芽孢杆菌(i>Bacillus coagulans/i>)之含有序列编号12、13或14所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测高抗热性芽孢杆菌(i>Bacillus sporothermodurans/i>)之含有序列编号15、43或44所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测属于枯草芽孢杆菌(i>Bacillus subtilis/i>)之含有序列编号16、17或18所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测地衣芽孢杆菌(i>Bacillus licheniformis/i>)之含有序列编号19所示之核苷酸序列之寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测短小芽孢杆菌(i>Bacillus pumilus/i>)之含有序列编号20或55所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测迟缓芽孢杆菌(i>Bacillus lenus/i>)之含有序列编号21至25所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测坚强芽孢杆菌(i>Bacillus firmus/i>)之含有序列编号26所示之核苷酸序列之寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测环状芽孢杆菌(i>Bacillus circulans/i>)之含有序列编号27所示之核苷酸序列之寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测苯分解性芽孢杆菌(i>Bacillus benzoevorans/i>)之含有序列编号29或30所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测巨大芽孢杆菌(i>Bacillus megaterium/i>)之含有序列编号31所示之核苷酸序列之寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测球形芽孢杆菌(i>Bacillus sphaericus/i>)之含有序列编号32或33所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测酸土脂环酸芽孢杆菌(i>Alicyclobacillus acidoterrestris/i>)之含有序列编号34、35或36所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测酸热脂环酸芽孢杆菌(i>Alicyclobacillus acidocaldarius/i>)属细菌之含有序列编号28或37所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测戈氏类芽孢杆菌(i>Paeniacillus validus/i>)之含有序列编号38、39或40所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测史氏芽孢杆菌(i>Bacillus smithii/i>)之含有序列编号45或46所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测嗜酸脂环酸芽孢杆菌(i>Alicylcobacillus acidophilus/i>)之含有序列编号47、48或49所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测属于脂环酸芽孢杆菌(i>Alicyclobacillus hesperidum/i>)之含有序列编号50或51所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测芽孢杆菌(i>Bacillus fumarioli/i>)之含有序列编号52或53所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测产酸芽孢杆菌(i>Bacillus acidgenesis/i>)之含有序列编号54所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,用于检测芽孢杆菌(i>Bacillus sonorensis/i>)之含有序列编号56或57所示之核苷酸序列之至少一种寡核苷酸探针,系经固定于基板上。如申请专利范围第1项所述之细菌检测器具,其中,含有序列编号1至40、43至56或57之核苷酸序列序列的寡核苷酸探针全部被固定于基板上。如申请专利范围第1至29项中任一项所述之细菌检测器具,其中,上述被检验试料中之细菌为选自以下(a)至(f)之任一项所记载细菌中之至少一种以上细菌:(a)属于芽孢杆菌(Bacillus)属之细菌;(b)属于短芽孢杆菌(Brevibacillus)属之细菌;(c)属于脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus)属之细菌;(d)属于硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus)属之细菌;(e)属于嗜热芽孢杆菌(Geobacillus)属之细菌;(f)属于类芽孢杆菌(Paenibacillus)属之细菌。如申请专利范围第1至29项中任一项所述之细菌检测器具,其中,于上述基板具有碳二亚胺基或异氰酸酯基,藉由该碳二亚胺基或异氰酸酯基与上述寡核苷酸探针或加成于寡核苷酸探针末端之连结基反应,以形成共价键结。如申请专利范围第30项所述之细菌检测器具,其中,于上述基板具有碳二亚胺基或异氰酸酯基,藉由该碳二亚胺基或异氰酸酯基与上述寡核苷酸探针或加成于寡核苷酸探针末端之连结基反应,以形成共价键结。一种细菌检测方法,系用以检测监定被检测试料中之细菌,其特征在于包括如下步骤:核酸调制步骤,其系调制被检测试料中之细菌的核酸;探针调制步骤,其系以该核酸为铸模而调制标识探针;杂交步骤,其系使用如申请专利范围第1至32项中任一项所述之细菌检测器具,而进行被固定于基板之寡核苷酸探针与上述标识探针之杂交;讯号检测步骤,其系检测杂交讯号。如申请专利范围第33项所述之细菌检测方法,其中,上述被检测试料为食品。如申请专利范围第34项所述之细菌检测方法,其中,上述食品为饮料。一种细菌检测套组,其系用于在被检测试料中检测与监定细菌,该套组包括申请专利范围第1至32项中任一项所述之细菌检测器具,以及用于寡核苷酸探针与衍生自该被检测试料之核酸之间之杂交的试药。
地址 日本