发明名称 一种以重组甲醇酵母发酵制备巴曲酶的方法
摘要 本发明的目的在于提供一种以重组甲醇酵母发酵制备巴曲酶的方法,包括酵母菌的分批发酵、补料发酵及甲醇诱导表达巴曲酶阶段,所述酵母菌是相对于天然的巴曲酶的第45位精氨酸突变为赖氨酸的重组定点突变巴曲酶,其特征在于,酵母菌的分批发酵、补料发酵的碳源为甘油,pH=5.0-5.5;甲醇诱导表达巴曲酶阶段的pH=6.8-7.0,温度为25℃,甲醇浓度为0.5%。研究结果表明,该方法可大幅提高发酵效率,使目的产物的表达量得到显著提高。
申请公布号 CN102242101A 申请公布日期 2011.11.16
申请号 CN201010166684.4 申请日期 2010.05.10
申请人 辽宁诺康医药有限公司 发明人 薛百忠;王宏英;薛雁;徐梅;王建华;姜大威;杨宇;孟威
分类号 C12N9/60(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N 主分类号 C12N9/60(2006.01)I
代理机构 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 代理人 张晨
主权项 一种以重组甲醇酵母发酵制备巴曲酶的方法,包括酵母菌的分批发酵、补料发酵及甲醇诱导表达巴曲酶阶段,所述酵母菌是相对于天然的巴曲酶的第45位精氨酸突变为赖氨酸的重组定点突变巴曲酶,其特征在于:酵母菌的分批发酵、补料发酵的碳源为甘油,pH=5.0‑5.5;甲醇诱导表达巴曲酶阶段的pH=6.8‑7.0,温度为25℃,甲醇浓度为0.5%。
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