人工合成猪生长激素基因及其表达纯化方法

摘要

本发明依据大肠杆菌偏爱密码子使用原则，设计了适合在大肠杆菌中高效表达的猪生长激素PGH的DNA序列，其表达的PGH蛋白与猪体内表达的PGH编码区氨基酸序列一致。将该基因克隆到pET-28a+表达系统中，转化大肠杆菌BL21(DE3)。0.5mmol/L IPTG，37℃诱导表达6小时的条件下，电泳检测到该基因的表达产物占全菌蛋白的70％以上，产物以包涵体的形式存在，适合规模化工业生产的需要。包涵体用低浓度尿素(2M)和高pH(12)缓冲液溶解，通过降低pH值至8.5，进行复性，复性率达到30％以上。进一步凝胶层析进行纯化，得到纯度达98％以上的PGH蛋白。

主权项

一种人工合成的猪生长激素PGH基因，其特征在于，它是序列表中SEQ ID NO1的核苷酸序列。