用于数字PCR的方法

摘要

本发明提供了进行核酸反应的方法，包括使用“油包液滴”技术进行数字PCR的方法。在该方法中，将起始样品至少部分分割成一组样品液滴，每个液滴平均包含大约一个或更少的拷贝的靶核酸。使液滴在穿过通道的不混溶载液的持续流中通过热循环仪，其中靶标被扩增。在一个实施方式中，每个液滴是大约350nl，在接近饱和点时计数阳性扩增的液滴数目。

主权项

进行核酸扩增反应的方法，所述方法包括：a)提供包含靶核酸的起始样品；b)分割至少一部分样品以提供在通过通道的不混溶载液的持续流中的一组样品液滴，每一个所述液滴平均包含大约1个或更少的拷贝的靶核酸和足以进行聚合酶链式反应的试剂；c)使所述液滴通过多个热区，从而允许靶核酸，如果存在的话，在每个液滴中被扩增；和d)检测所述流中的液滴中的扩增的靶核酸的存在或不存在，和/或测定其数量。