甘蔗组培一次成苗快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种甘蔗组培一次成苗的方法。以健壮甘蔗的幼嫩心叶或茎尖生长锥作为外植体，一次成苗培养40～50天左右获得带少量蔗根的小苗后，将其转入生根培养基中经10～20天的促根处理后，然后进入炼苗和假植阶段。或在一次性成苗培养基中培养50～70天左右，获得根系长势较好的甘蔗完整小苗后直接进入炼苗和假植阶段。本发明不更换、或只更换一次培养基，有效减少了常规甘蔗侧芽或嫩叶诱导愈伤组织及分化过程中多次转接造成的污染，简化了甘蔗组培苗生产的程序，节约成本，成苗率高，显著缩短了甘蔗组培苗的生产周期，适用于甘蔗种苗工厂化快速繁殖。

主权项

一种甘蔗组培一次成苗的快速繁殖方法，包括外植体的取材及灭菌、接种进行一次成苗培养、生根培养、炼苗移栽步骤，其特征在于：外植体的取材及灭菌步骤：取经灭菌处理15～20min，用无菌水冲洗3～4次的甘蔗茎尖顶部1～3cm部分或生长点以上不大于8cm的幼嫩心叶，作为脱毒组培用外植体；一次成苗培养步骤：在无菌条件下，将消毒好的外植体切成厚0.5～2.5mm的圆盘片，接种于一次成苗培养基上，置于25～32℃的黑暗条件下培养7～10天，然后转入光照条件培养，光照强度2000～2500Lux，每天光照时间10～16小时，温度25～32℃；光照条件培养10～30天后，外植体上出现欲分化的芽点和已分化的幼苗；所述一次成苗培养基是：MS+蔗糖30000mg/L+KT 0.5～1.5mg/L+NAA 0.5～1.5mg/L+IAA 1～2mg/L+琼脂或卡拉胶6000～8000mg/L；生根培养步骤：将一次成苗培养40～50天后带有少量根系的株高为3～5cm的幼苗转入生根培养基培养；所述生根培养基是：1/2MS+蔗糖50000mg/L+NAA 0.5～1.5mg/L+IBA 1.0～2.5mg/L；炼苗移栽步骤：将生根培养10～20天且根系达2～3cm的完整小苗，进行炼苗移栽。