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一种非洲菊灰霉病抗性鉴定的方法，按以下步骤进行：（1）适宜的接种材料的选择，以新鲜采集的完整幼叶或花瓣作为接种材料；（2）灰霉菌Botrytis cinerea培养及其分生孢子悬浮液的制备用马铃薯葡萄糖琼脂培养基培养灰霉菌，将‑70～‑80℃低温保存的灰霉菌于超菌工作台接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基中，于18℃～25℃温度，光照强度为1000～2000lx条件下16 h连续光照培养培养3天后，转入黑暗条件培养7～15天，菌丝长满整个培养皿后，用含有质量分数为0.1%吐温‑20的灭菌蒸馏水悬浮培养皿中所培养的分生孢子，用小孔计数法制备每毫升孢子数为1×107个的分生孢子贮备液供接种用； （3）制备接种液于接种前，将步骤（2）获得的分生孢子贮备液稀释为含有质量分数为3%的马铃薯葡萄糖和分生孢子数为1×106个/ml浓度的接种液供接种用或将步骤（2）获得的分生孢子贮备液稀释为含有质量分数为6%的马铃薯葡萄糖和分生孢子数为3×105个/ml浓度的接种液供接种用；（4）接种用微量移液器取2μl的接种液以液滴的方式将孢子液接种到步骤（1）所述的幼叶或花瓣，将该幼叶或花瓣材料保持在相对湿度为90%～95%、光照强度为1000lx～2000lx、温度为18℃～25℃的条件下, 接种24h后开始观察病情发展，根据病情发展的速度及病情指数判断供试材料的抗性, 花瓣在48h内病情指数达到3～5级为感病品种，幼叶在120h内病情指数达到3～5级为感病品种。 |
