以纯棉毛巾为载体的固定化脂肪酶的制备方法

摘要

本方法提供以纯棉毛巾为载体的固定化脂肪酶的制备方法，即用纯棉毛巾吸附聚乙烯亚胺水溶液，吸附完成后，加入脂肪酶溶液，经恒温摇床震荡，酶附着在含有聚乙烯亚胺的纯棉毛巾上，除去上清液，再用交联剂对吸附了酶和聚乙烯亚胺的毛巾进行交联的固定化技术。本发明采用的毛巾载体具有多空隙，毛巾纤维较长，因而具有较大的比表面积，有利于固定化酶催化反应的进行，并且具有非常好的机械强度，与颗粒状载体相比，酶更容易从反应体系中分离出来；采用的交联剂三羟甲基磷比戊二醛具有更好的交联效果；采用的固定化方法具有条件温和、多层固定的优点；制得的固定化酶具有良好的温度稳定性，反应酶活高，可缩短反应时间，能反复多次使用。

主权项

以纯棉毛巾为载体的固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于包括以下步骤：首先将聚乙烯亚胺水溶液滴在毛巾上，待毛巾吸收聚乙烯亚胺水溶液完成后，加入用蒸馏水配好的脂肪酶溶液，经恒温摇床震荡，酶吸附在含有聚乙烯亚胺的纯棉毛巾上，除去上清液，再用交联剂对吸附了酶和聚乙烯亚胺的毛巾进行交联，交联完成后，取出毛巾，用缓冲液清洗毛巾，直到没有蛋白洗脱下来，室温下干燥得到固定化脂肪酶；所述脂肪酶包括碱性脂肪酶、猪胰脂肪酶或酯化用脂肪酶，所述交联剂包括三羟甲基磷水溶液或戊二醛水溶液和三羟甲基磷水溶液的混合物。