| 主权项 |
一种纯化透明质酸的方法，其包含下列步骤：(a)提供一可生产透明质酸微生物之醱酵液，其中该醱酵液中透明质酸的含量为0.05至0.25克/升；(b)于步骤(a)之混合液中加入活性碳，并使活性碳与该醱酵液充分反应；其中活性碳之含量相对于该醱酵液体积为3至20克/升；(c)调整步骤(b)中含活性碳醱酵液之pH值为2至4；(d)将步骤(c)中含活性碳之醱酵液通过一筛网，以供活性碳于该筛网上形成一滤饼，并使透明质酸通过该滤饼；其中筛网的面积系容活性碳以0.02至0.14克/平方公分之量形成滤饼，且筛网之筛孔大小为自500至800孔/平方英寸；及(e)去除步骤(d)滤液中残余活性碳，由滤液中纯化透明质酸。根据申请专利范围第1项之方法，其中该微生物为链球菌属(i>Streptococcus sp/i>.)之微生物。根据申请专利范围第2项之方法，其中该微生物为兽瘟链球菌(i>Streptococcus zooepidemicus/i>)。根据申请专利范围第1项之方法，其中步骤(b)中另包含搅拌该该醱酵液，以使活性碳与该醱酵液充分反应。根据申请专利范围第4项之方法，其中步骤(b)中另包含于4℃搅拌该醱酵液8至24小时，以使活性碳与该醱酵液充分反应。根据申请专利范围第1项之方法，其中步骤(b)中活性碳之量相对于混合液体积为4至7克/升。根据申请专利范围第6项之方法，其中步骤(b)中活性碳之量相对于混合液体积为5克/升。根据申请专利范围第1项之方法，其中步骤(c)中之pH值为3。根据申请专利范围第1项之方法，其中步骤(d)筛网的面积系容活性碳以004克/平方公分之量形成滤饼。根据申请专利范围第1项之方法，其中步骤(d)中筛网之筛孔大小为600孔/平方英寸。根据申请专利范围第1项之方法，其中步骤(e)去除滤液中残余的活性碳系以膜过滤去除。根据申请专利范围第11项之方法，其中膜过滤系通过0.2至1.2μm滤膜。根据申请专利范围第1项之方法，其中于步骤(e)后另包含滤洗步骤。根据申请专利范围第13项之方法，其中滤洗系以分子量为50至300K之超过滤膜，并加入超纯水进行。根据申请专利范围第1项之方法，其中于步骤(e)后另包含酒精沈淀步骤。一种纯化透明质酸的方法，其包含下列步骤：(a)提供一可生产透明质酸微生物之醱酵液，其中该醱酵液中透明质酸的含量为0.05至0.25克/升；(b)于步骤(a)之混合液中加入活性碳，并使活性碳与醱酵液充分反应；其中活性碳之含量相对于该醱酵液体积为3至20克/升；(c)调整步骤(b)中含活性碳醱酵液之pH值为2至4；(d)将步骤(c)中含活性碳之醱酵液通过一筛网，以供活性碳于该筛网上形成一滤饼，并使透明质酸通过该滤饼；其中筛网的面积系容活性碳以0.02至0.14克/平方公分之量形成滤饼，且筛网之筛孔大小为自500至800孔/平方英寸；及(e)将步骤(d)之滤液通过0.2至1.2μm滤膜至少一次；(f)将步骤(e)之滤液以分子量为50至300K之超过滤膜滤洗，并收集未通过超过滤膜之溶液；及(g)酒精沈淀步骤(f)中之未通过超过滤膜之溶液，以纯化得该透明质酸。根据申请专利范围第16项之方法，其中该微生物为链球菌属(i>Streptococcus sp/i>.)之微生物。根据申请专利范围第17项之方法，其中该微生物为兽瘟链球菌(i>Streptococcus zooepidemicus/i>)。根据申请专利范围第16项之方法，其中步骤(b)中另包含搅拌该含活性碳之混合液，以使活性碳与混合液充分反应。根据申请专利范围第19项之方法，其中步骤(b)中另包含于4℃搅拌该含活性碳之混合液8至24小时，以使活性碳与混合液充分反应。根据申请专利范围第16项之方法，其中步骤(b)中活性碳之量相对于混合液体积为4至7克/升。根据申请专利范围第21项之方法，其中步骤(b)中活性碳之量相对于混合液体积为5克/升。根据申请专利范围第16项之方法，其中步骤(c)中之pH值为3。根据申请专利范围第16项之方法，其中步骤(d)筛网的面积系容活性碳以0.04克/平方公分之量形成滤饼。根据申请专利范围第24项之方法，其中步骤(d)中筛网之筛孔大小为600孔/平方英寸。 |
