发明名称 一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用
摘要 本发明一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用,包括步骤:1.突变酶突变位点的引入:2.鉴定重组质粒;3.测序,获得带有1060位突变位点的PCR片段;4.经胶回收纯化后,用限制性内切酶,获得大肠杆菌;5.鉴定重组质粒,得到一种分离的蛋白基因;6.培养大肠杆菌;7.将重组质粒转化BL21感受态细胞,得到表达突变酶的菌株;8.将上述获得的BL21表达菌株培养;9.将5蛋白的菌液离心,再通过超声破碎,离心获取上清;10.测定,获得有高热稳定性又有高酶活的萤火虫荧光素酶。一种萤火虫荧光素酶的基因在食品、医药、菌体检测上的应用。该突变酶的发光强度是野生型的15-20倍左右,并且较野生型具有良好的热稳定性。
申请公布号 CN102191213A 申请公布日期 2011.09.21
申请号 CN201110093484.5 申请日期 2011.04.14
申请人 中国科学院武汉病毒研究所 发明人 危宏平;赵金凤;王殿冰;张治平;张先恩
分类号 C12N1/21(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I;C12Q1/66(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 主分类号 C12N1/21(2006.01)I
代理机构 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人 王敏锋
主权项 一种大肠杆菌,其特征在于:大肠杆菌DH5α‑firefly luciferase­­‑E354K,I423L,D436G,L530R,CCTCC NO.M2011062。
地址 430071 湖北省武汉市武昌小洪山