发明名称 |
一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用 |
摘要 |
本发明一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用,包括步骤:1.突变酶突变位点的引入:2.鉴定重组质粒;3.测序,获得带有1060位突变位点的PCR片段;4.经胶回收纯化后,用限制性内切酶,获得大肠杆菌;5.鉴定重组质粒,得到一种分离的蛋白基因;6.培养大肠杆菌;7.将重组质粒转化BL21感受态细胞,得到表达突变酶的菌株;8.将上述获得的BL21表达菌株培养;9.将5蛋白的菌液离心,再通过超声破碎,离心获取上清;10.测定,获得有高热稳定性又有高酶活的萤火虫荧光素酶。一种萤火虫荧光素酶的基因在食品、医药、菌体检测上的应用。该突变酶的发光强度是野生型的15-20倍左右,并且较野生型具有良好的热稳定性。 |
申请公布号 |
CN102191213A |
申请公布日期 |
2011.09.21 |
申请号 |
CN201110093484.5 |
申请日期 |
2011.04.14 |
申请人 |
中国科学院武汉病毒研究所 |
发明人 |
危宏平;赵金凤;王殿冰;张治平;张先恩 |
分类号 |
C12N1/21(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I;C12Q1/66(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/21(2006.01)I |
代理机构 |
武汉宇晨专利事务所 42001 |
代理人 |
王敏锋 |
主权项 |
一种大肠杆菌,其特征在于:大肠杆菌DH5α‑firefly luciferase‑E354K,I423L,D436G,L530R,CCTCC NO.M2011062。 |
地址 |
430071 湖北省武汉市武昌小洪山 |