非分离式测定方法

摘要

公开了与特异性结合反应有关的测定方法，其与已知方法相比更简单化。能够产生化学发光的化合物被固定在固体支持物上，作为用于捕获样品中分析物的特异性结合配对成员。可以激活所述化学发光化合物并且被结合于特异结合性配对成员的活化剂化合物被过量地与样品一起添加至所述固体支持物。在活化剂结合物已经特异性地结合的位点，引发剂溶液的添加引起化学发光反应。该测定方法被称为非分离式测定法，因为在检测步骤之前，不需要除去或者分离过量的检测标签(活化剂结合物)。该方法适用于多种类型的测定，包括免疫测定、受体-配体测定和核酸杂交测定。

主权项

1.一种试剂盒，其包括：a)固体支持物，其上固定有下述物质：(1)可作为过氧化物酶作用底物的化学发光化合物，其包含选自下组的化学发光部分：9，10-二氢化吖啶酯、9，10-二氢化吖啶硫酯、9，10-二氢化吖啶磺酰胺、9，10-二氢化吖啶二硫缩烯酮化合物、下述化学式所示的9，10-二氢化吖啶类化合物：其中，R¹选自于烷基、烯基、炔基、芳基以及1-20个碳原子的芳烷基，所述碳原子可任意被1-3个选自于下面的基团取代：羰基、羧基、三(C₁-C₈烷基)甲硅烷基基团、SO₃^-基团、OSO₃^-2基团、葡糖基基团、PO₃^-基团、OPO₃^-2基团、卤素原子、羟基、硫醇基、氨基团、季铵基团或季磷基团；X选自于C₁-C₈烷基、芳基、芳烷基、具有1-20个碳原子的烷基或芳基羧基、三(C₁-C₈烷基)甲硅烷基基团、SO₃^-基团、葡糖基基团和化学式PO(OR′)(OR″)所示的磷酰基基团，其中R′和R″是独立地选自于C₁-C₈烷基、氰烷基、芳基和芳烷基、三甲硅烷基团、碱金属阳离子、碱土金属阳离子、铵以及三烷基鏻阳离子；Z¹选自于O原子和S原子；R⁶选自于取代或未取代的C₁-C₄烷基、苯基、苯甲基、烷氧基烷基和羧烷基基团；所述取代基R^7-14中的0个或1个或2个选自于烷基、烷氧基、羟基以及卤素，而其余的R^7-14是氢；以及(2)用于分析物的第一特异性结合配对体，以及b)具有活化剂化合物的活化剂结合物，所述活化剂化合物被结合于第二特异性结合配对体，其中，所述活化剂化合物是过氧化物酶。