摘要 |
1. Способ синтеза иммуноаффинного сорбента для выделения альфа-фетопротеина человека, заключающийся в том, что осуществляют активирование углеводной матрицы (геля) добавлением 0,07 М раствора периодата натрия и после 45-минутного перемешивания при комнатной температуре добавляют 2 М раствор этиленгликоля и вновь перемешивают при той же температуре 30 мин с последующей отмывкой водой очищенной и калий бифосфонатным буферным раствором последовательно. ! 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что присоединение белка АФП с активированной матрицей при постоянном перемешивании производят в течении 48 ч при 4-8°С в темноте. ! 3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что отмывку матрицы с пришитыми антителами против АФП осуществляют ледяным PBS 0,15 М рН 7,25; выполняют блокирование непрореагировавших групп боргидридом натрия при медленном перемешивание в течение 1 ч при 4°С в темной посуде; производят отмывку PBS 0,15 М рН 7,25, далее промывают охлажденным КББ 0,1 М рН 8 на 0,5 М натрия хлорида и охлажденным ацетатным буфером поочередно трижды, после этого промывают 0,15 М натрием хлорида 400 мл и хаотропным реагентом (магния хлоридом 2,8 М рН 2,3 с 0,5% Тритоном Х-100); далее промывают 0,15 М натрием хлорида, консервируют полученный таким образом иммуноаффинный собент в PBS 015 М рН 7,25 с азидом и полусинтетическим пенициллиновым антибиотиком не менее 2 л. |