含JERE盒的诱导型启动子及构建和在基因工程上的应用

摘要

本发明提供了一种含JERE盒的诱导型启动子及构建和在基因工程上的应用，所述诱导型启动子至少含有SEQIDNo.1所示的核苷酸序列，构建方法是将双子叶植物欧芹中鉴定的应答逆境胁迫的JERE盒与CaMV35S启动子核心序列融合构建成诱导型启动子。本发明的含JERE的诱导型启动子本底表达低、应答速度快、持续时间长、表达强度适中，该诱导型启动子在转基因水稻中可较好地应答水稻稻瘟病菌侵染、稻纵卷叶螟取食和机械损伤等生物与非生物胁迫，在单子叶植物水稻抗病、虫基因工程中具有十分重要的应用价值，其转基因植物株系在诱导植物抗病的小分子化合物高通量筛选中也有重要的应用价值。

主权项

一种含二倍盒的诱导型启动子瞬间表达载体在单子叶植物水稻抗病、虫基因工程中的应用，其特征在于：所述诱导型启动子瞬间表达载体的构建方法如下：将合成的带有XbaI和SpeI限制性酶切位点的JERE盒双链寡核苷酸片段插入pBT10‑GUS的相应酶切位点上，获得含有单拷贝JERE盒的载体pBT10‑X‑GUS，将载体pBT10‑X‑GUS分别用XbaI/SacI和SpeI/SacI组合酶切，37°酶切3‑5h，回收含JERE盒的片段通过使用T4连接酶进行连接、转化大肠杆菌DH5а和验证，从而获得带有2个JERE盒拷贝串联的瞬间表达载体pBT10‑XX‑GUS；所述JERE盒的核苷酸序列为AGACCGCCAAAGAGGACCCAGAAT。