一种海带孢子体DNA的制备方法

摘要

本发明提供了一种海带孢子体DNA的制备方法，可以解决现有技术存在的褐藻多糖去除不够彻底、过程繁琐、既费时费用又高的问题。技术方案步骤如下，1)取海带孢子体在清水中反复清洗后置于液氮中，迅速研成粉末；2)将藻粉转入SDS提取缓冲液中，65℃保温60min；3)加入KAc溶液，混合均匀，第一次去多糖；4)离心，取上清，加入异丙醇沉淀DNA；5)离心，弃上清，加入CTAB溶液第二次去多糖；6)离心，水相用KAc溶液第三次去多糖；7)加入氯仿∶异戊醇抽提；8)重复4)步，9)离心，70％冷乙醇洗DNA沉淀，稍干后溶于TE中，加入RNase，得产品。本发明的优点：速度快，效果好，提取效率高，无污染，操作费用较低。

主权项

一种海带孢子体DNA的制备方法，其特征在于包括如下步骤：1)取海带孢子体在清水中反复清洗，以去除海带孢子体表面的杂质，并在液氮中迅速将海带孢子体研成藻粉粉末；2)将上述藻粉粉末转入SDS提取缓冲液中，63‑65℃保温60min；3)加入KAc溶液，混合均匀，第一次去除褐藻多糖；4)离心，取上清，加入异丙醇；5)离心，弃上清，加入CTAB提取缓冲液，第二次去除褐藻多糖；6)离心，在水相加入KAc溶液，第三次去除褐藻多糖；7)加入氯仿与异戊醇混合液抽提；8)离心，水相用异丙醇于‑18至‑20℃沉淀；9)离心，用70％冷乙醇洗沉淀，稍干后溶于TE中，加入RNase，得终产品海带孢子体DNA。