发明名称 用PCR检测水稻基因的方法及其用于该方法的PCR缓冲液
摘要 本发明涉及一种用PCR检测水稻基因的方法及其用于该方法的PCR缓冲液,其中用PCR检测水稻基因的方法,由以下几个步骤组成:(1)获取PCR用水稻模板:切取0.5-3 mm2长的水稻叶片直接为模板;(2)PCR反应液的配置,包括引物、PCR缓冲液、DNTP、酶;(3)进行PCR扩增;(4)凝胶电泳分析基因检测结果。本发明和现有技术相比,无需对水稻DNA进行提取,以少量叶片(无需任何处理)直接用于PCR扩增,获得稳定的PCR扩增体系,节省了大量的时间,人工和药品试剂的成本。所需仪器设备单一(省去提取DNA所需的离心机等设备)、步骤过程简略,每人每天可做上千个样品的PCR检测(PCR仪充分的情况下)。
申请公布号 CN101429561B 申请公布日期 2011.08.10
申请号 CN200810306357.7 申请日期 2008.12.18
申请人 温州市农业科学研究院 发明人 罗天宽;张小玲;朱世杨;陈海英;杨文清;卢华金;唐征;刘庆
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 温州瓯越专利代理有限公司 33211 代理人 张瑜生
主权项 一种用PCR检测水稻基因的方法,由以下几个步骤组成:(1)获取PCR用水稻模板:切取0.5‑3 mm2大小的水稻叶片直接为模板;(2)PCR反应液的配置,包括引物、PCR缓冲液、DNTP、酶;(3)进行PCR扩增;(4)凝胶电泳分析基因检测结果;其中,PCR反应液成分为:50 mmol/L KCl, 2.5 mmol/L MgCl2, 30mmol/L ( NH4) 2SO4,20 mmol/L Tris‑Cl,PH值为9.0,0.2mmol/L DNTP ,DMSO 2%,BSA20μg/mL,0.5μmol/L的PCR正、反向引物,2U的Tag DNA聚合酶。
地址 325000 浙江省温州市六虹桥路1000号
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