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Proceso para el aislamiento selectivo, purificación y separación de compuestos 3,17-dicetoesteroides monohidroxilados a partir de una solución obtenida mediante hidroxilación microbiológica que contiene una mezcla de compuestos esteroides a través de la extracción selectiva, purificación y cristalización selectiva de los compuestos esteroides, caracterizado porque a) se elimina la biomasa del caldo de fermentación, en caso dado después de tratamiento con ácido fosfórico, mediante filtración o centrifugación, se aíslan los compuestos esteroides del filtrado con una cetona o un éster alifático de un alcohol alifático, se eliminan selectivamente las impurezas de tipo no esteroide de la fase orgánica mediante tratamiento con una solución acuosa de carácter básico y se obtiene el producto cristalino crudo que contiene los esteroides hidroxilados mediante adición de agua y evaporación del disolvente, y b) se disuelven los compuestos esteroides de la superficie de la biomasa filtrada obtenida en la etapa a) mediante tratamiento con cetonas o alcoholes alifáticos de 1 a 4 carbonos o con una solución acuosa de los mismos y se obtiene el producto cristalino crudo que contiene los esteroides hidroxilados después de evaporación del disolvente, luego c) se disuelve el producto obtenido en la etapa a) o en caso dado la mezcla de los dos productos crudos obtenidos en las etapas a) y b) en una cetona o un alcohol alifático de 1 a 4 carbonos miscible en agua o una solución acuosa de los mismos, se decolora la solución y se aíslan los cristales crudos homogéneos purificados después de la evaporación del disolvente, y d) se recristalizan los cristales crudos homogéneos purificados obtenidos en la etapa c) a partir de una mezcla hidrocarburo clorado/hidrocarburo alifático o cicloalifático y se aísla el producto puro.
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