一种羟基红花黄色素A的制备方法

摘要

本发明涉及一种羟基红花黄色素A的制备方法，该方法利用高速逆流色谱从红花中快速大量制备高纯度羟基红花黄色素A，为红花制剂及羟基红花黄色素A的药理药效学研究提供了物质基础。通过该方法获得的产品羟基红花黄色素A纯度可以达到标准品的要求，该方法工艺简单，快速，量大，成本低，无环境污染，既适用批量的制备，也适用于小剂量的制备。

主权项

一种羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：a、提取：取红花的干燥花，加入10‑20倍重量的去离子水，温度80℃水浴浸泡10‑60分钟，用水回流提取2次，合并提取液，减压浓缩至提取液体积的50％，得到提取液；b、分离：将提取液加入3‑10％吸附澄清剂壳聚糖或101果汁澄清剂或ZTCⅡ天然澄清剂除杂，上大孔吸附树脂，待流出液Molish反应呈阴性时，用浓度为5‑50％乙醇进行洗脱，得到红花粗提物；或将提取液直接上大孔吸附树脂，待流出液Molish反应呈阴性时，用浓度为5‑50％乙醇进行洗脱，得到红花粗提物；c、高速逆流色谱法分离：采用高速逆流色谱仪，色谱仪分离溶剂系统由两相或三相组分形成的溶剂，分别是正丁醇或正戊醇与盐酸组成两相，或正丁醇或正戊醇和甲醇或乙醇和盐酸组成三相，其中各组分体积比为1‑3∶0‑2∶0.5‑2；d、将溶剂系统配置于分液漏斗中，充分振摇后静置分层，取上层相溶液作为固定相，下层相溶液作为流动相，将粗提物溶于上层相和下层相的混合溶液中，使高速逆流色谱仪柱子中充满固定相，然后使其主机转动，再将流动相泵入柱，再由进样阀进入粗提物溶于上层和下层的混合溶液，保留时间为100‑200分钟，使用的高速逆流色谱仪流速范围为1‑3ml/min，转速范围为700‑1000转数，根据检测器谱图或高效液相色谱的检测结果接收目标成分羟基红花黄色素A；e、纯化除酸：将高速逆流得到的样品羟基红花黄色素A进行柱层析，柱子的径高比为1∶50‑100，超纯水以0‑3ml/min的流速洗脱，收集橙黄色色带流份，于温度30‑80℃条件下浓缩干燥，即可得到羟基红花黄色素A干粉。