从含羞草中分离纯化黄酮苷单体的方法

摘要

从含羞草中分离纯化黄酮苷单体的方法，属于中药技术领域。所采取的技术方案是：以含羞草为原料，采用超声提取、浓缩后醇沉除杂、再浓缩后大孔吸附树脂柱色谱分离富集、再结合凝胶树脂柱色谱技术、硅胶柱色谱技术从中分离得到牡荆苷、荭草苷、异荭草苷3个单体化合物，三者的提取率分别为1.12％、2.62％和2.21％，纯度均达到95％以上。该方法具有操作简单、成本低、纯度好、收率高、大孔树脂和溶剂可反复回收使用、工艺中不用有毒溶剂、无环境污染、易于产业化生产等优点。

主权项

从含羞草中分离纯化黄酮苷单体的方法，其特征在于包括以下步骤：1)原料处理：将含羞草全草粉碎成粗粉，过20～40目筛；2)提取：将含羞草粗粉放入提取容器中，并将其置入超声波提取器中，在50～60℃的条件下每次用6～8倍量的40％～60％含水乙醇做溶剂超声提取2～3次，每次30～60min，抽滤，合并滤液；3)减压浓缩：将步骤2)的滤液在水浴温度60℃以下真空薄膜浓缩至滤液无醇味，回收乙醇，得到浓缩液；4)醇沉除杂：在步骤3)的浓缩液中加入等体积的乙醇，搅拌后放置过夜，析出多糖等水溶性杂质沉淀，抽滤，除去沉淀物，滤液备用；5)减压浓缩：将步骤4)的滤液继续在60℃以下真空薄膜浓缩，得到浓缩液；6)大孔树脂纯化：将步骤5)的浓缩液通过大孔吸附树脂分离富集，先用H2O洗脱，再依次用10％～70％的含水乙醇进行梯度洗脱，洗脱流速为5～15mL·min‑1，分别收集3倍柱体积的各部位洗脱液，合并20～60％含水乙醇各部位的洗脱液，将合并的洗脱液在60℃以下真空浓缩成膏状物；7)凝胶柱色谱分离：将步骤6)的膏状物通过凝胶柱色谱分离，先用H2O洗脱，再依次用10％～70％的含水乙醇进行梯度洗脱，洗脱流速为3～5mL·min‑1，分别收集3倍柱体积的各部位洗脱液，合并30～50％含水乙醇各部位的洗脱液，将合并的洗脱液在60℃以下真空浓缩成膏状物；8)硅胶柱色谱分离：将步骤7)的膏状物通过硅胶柱色谱分离，以体积比6∶2∶1～7∶2∶3的乙酸乙酯‑乙醇‑水进行梯度洗脱，分别收集洗脱液，通过TLC检识，合并相同流分，分别得到牡荆苷、荭草苷及异荭草苷单体。