狗鱼幼鱼弹状病毒RT-PCR检测方法和试剂盒

摘要

本发明公开了狗鱼幼鱼弹状病毒(PFRV)的RT-PCR检测方法和试剂盒。本发明的检测方法和试剂盒使用特异性引物对PFRV进行检测，引物具有很好的引发特性，具有较宽的Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度和退火温度范围，本发明建立的RT-PCR检测方法具有很好的特异性，具有较高的灵敏度，检测病毒悬液抽提核酸的灵敏度均达102.5TCID50。

主权项

狗鱼幼鱼弹状病毒(Pike fry rhabdovirus，PFRV)的RT‑PCR检测方法，所述方法包括利用特异性引物对，以病毒基因组RNA为模板进行RT‑PCR反应，其特征在于：所述引物对为能扩增出狗鱼幼鱼弹状病毒G基因的基因片段的引物对，并且所述引物对选自以下中的至少一组：a：分别含有Seq ID No.1和Seq ID No.2所示序列的引物对；Seq ID No.1：5’‑‑AGTTGTCGTACATCCTGTTCATTTAG‑‑3’Seq ID No.2：5’‑‑ATGTTATCTCTTCCCTTCGATTGAT‑‑3’b：分别含有Seq ID No.3和Seq ID No.4所示序列的引物对，Seq ID No.3：5’‑‑GTTGTCGTACATCCTGTTCATTTAG‑‑3’Seq ID No.4。5’‑‑GTGCAAGCTCTCCTTTTTTCTC‑‑3’。