用于PCR分析的检测算法

摘要

本发明提供用于改进经标记核酸探针(例如那些用于PCR反应中者)的结合的检测准确度的方法。一种所述方法包括在较高温度和较低温度两个不同温度下测量标记强度(例如荧光)，且然后计算所述较低温度下的所述标记强度与所述较高温度下的所述标记强度的比率。另一方法包括测量PCR后的至少两个时间点下的标记强度并计算所述标记强度随时间变化的斜率。测量所述探针结合至靶核酸的杂交动力学允许计算比率斜率，此使得此方法具有良好的检测特异性。

主权项

一种用于检测经标记核酸探针至其靶核酸的杂交的方法，其包括：(a)使怀疑含有靶核酸的试样与可与所述靶核酸杂交的经标记核酸探针接触；(b)在第一温度和第二温度下测量标记强度，其中所述第一温度小于所述第二温度；(c)计算(i)所述第一温度下的所述标记强度与(ii)所述第二温度下的所述标记强度的比率，其中至少0.8的比率表明存在所述靶核酸。