结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法

摘要

本发明提供结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法，设计对结核分枝杆菌进行定性、定量检测的引物、自身淬灭探针，引物的上游引物为5’-ACTCCATGGGATACGGCCCAGACTCCT-3’，下游引物为5’-CGCAAGCTTCATTCCACCGCTACACCAG-3’，自身淬灭探针的上游引物为5’-cgcgCTCGTAGGTGGTTTGTCGC(FAM)G-3’，下游引物为5’-CCCGCACGCTCACAGTTAAG-3’，上游引物3’端最后一个碱基为G，在3’端的第二个碱基为C，在这个C上标记荧光物质FAM，在探针的5’端引入几个和3’末端互补的碱基(cgcg)以便自身配对形成发夹结构。通过提取待测样品的DNA，再结合实时荧光定量PCR检测技术，可达到准确定量待测标本中结核分枝杆菌DNA的目的。

主权项

一种结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法，其特征在于：提供用于对结核分枝杆菌进行定性、定量检测的引物和自身淬灭探针，所述引物的上游引物为5’‑ACTCCATGGGATACGGCCCAGACTCCT‑3’，下游引物为5’‑CGCAAGCTTCATTCCACCGCTACACCAG‑3’，所述自身淬灭探针的上游引物为5’‑cgcgCTCGTAGGTGGTTTGTCGC(FAM)G‑3’，下游引物为5’‑CCCGCACGCTCACAGTTAAG‑3’，上游引物3’端最后一个碱基为G，在3’端的第二个碱基为C，在这个C上标记荧光物质FAM，在探针的5’端引入几个和3’末端互补的碱基(cgcg)以便自身配对形成发夹结构。