利用具有裸蛹性状的杂交种雌蚕无性克隆系提高家蚕杆状病毒系统表达外源基因效率的方法

摘要

本发明公开了一种以具有裸蛹性状、适于基因工程操作的杂交种雌蚕无性克隆系(后代全部为雌性)为宿主，有效提高利用杆状病毒系统表达外源基因效率的方法。它以生产上推广应用的家蚕杂交种为素材，利用雌蚕无性克隆技术，选择蛹体大、生命力强、发生率和孵化率高的个体留种继代，经多年多代个体和蛾区选育，育成了无性克隆发生率和孵化率分别达90％和80％以上、蛹体大、生命力强的杂交种雌蚕无性克隆系；在此基础上，与裸蛹品种(带Nd基因，不吐丝结茧)杂交，通过回交、标记基因选择等方法，使杂交种雌蚕无性克隆系在保持原有性状的同时，兼具裸蛹性状，更适于基因工作操作，不用削茧、倒蛹，有效提高了外源基因的表达效率。

主权项

利用具有裸蛹性状的杂交种雌蚕无性克隆系提高家蚕杆状病毒系统表达外源基因效率的方法，其特征在于以常规二化性杂交种为无性克隆系选育的素材，应用温汤处理技术进行雌蚕无性克隆继代，选择优良个体留种，经多年多代无性克隆选育，无性克隆10代以上，育成高发生率和孵化率、后代全雌、蛹体大、生命力强的杂交种雌蚕无性克隆系；将杂交种雌蚕无性克隆系与带Nd基因，不吐丝结茧的裸蛹品种雄蚕杂交，根据裸蛹Nd基因的表现型，从后代中选择具有裸蛹性状的雄蚕与杂交种雌蚕无性克隆系进行回交，从回交后代中再选择具有裸蛹性状的雄蚕与杂交种雌蚕无性克隆系进行回交，回交3次，育成具有裸蛹性状的杂交种雌蚕无性克隆系；以具有这种裸蛹性状的杂交种雌蚕无性克隆系为宿主，利用家蚕杆状病毒系统表达外源基因。