动物饲料中4种细菌16s rDNA PCR-RFLP指纹图谱分析方法

摘要

本发明为动物饲料中4种细菌的PCR-RFLP检测技术，具体地说是用14种内切酶对存在于动物饲料中的4种芽孢杆菌的16s rDNA进行酶切，每种菌形成一个16s rDNA的内切酶指纹图谱，从而建立4种菌的检测方法。方法包括PCR扩增16s rDNA，然后以14种内切酶分别对4种菌的16s rDNA扩增产物进行酶切，再经琼脂糖凝胶电泳。4种细菌分别是：阪崎肠杆菌、戴氏西地西菌、金黄色葡萄球菌、居泉沙雷菌。具体检测方法包括4种菌DNA的提取、PCR扩增16s rDNA、内切酶酶切、琼脂糖凝胶电泳、PCR-RFLP指纹图谱的建立。其优点是快速、特异性强、灵敏度高、操作简便。

主权项

存在于动物饲料中4种细菌鉴定的快速检测方法，其特征在于所使用的内切酶种类及酶切后形成的指纹图谱：共用14种内切酶4种细菌进行酶切鉴定，14种内切酶为：Ava I，BamH I，BgII，Dra I，EcoR I，EcoRII，HindIII，Hinf，Hpa I，Pst I，Sma I，Taq I，Xba I，Xma I，并按照这样的顺序进行酶切。指纹图谱为这14种内切酶切割后形成14道的电泳图谱，而且每种菌均具有特异而且唯一的指纹。