| 摘要 |
1. Способ получения библиотеки когнатных пар, содержащей сцепленные кодирующие последовательности вариабельной области, где указанный способ включает: ! a) получение от донора клеточной фракции, содержащей лимфоциты, ! b) получение популяции выделенных единичных клеток, включающее распределение клеток из указанной клеточной фракции индивидуально во множество резервуаров, где, по меньшей мере, субпопуляция клеток экспрессирует антиген CD43 и CD138 или антиген MHCII и B220, ! c) амплификацию и осуществление сцепления кодирующих последовательностей вариабельных областей, содержащихся в указанной популяции выделенных единичных клеток, посредством амплификации в мультиплексной процедуре молекулярной амплификации представляющих интерес нуклеотидных последовательностей с использованием матрицы, полученной из выделенной единичной клетки или популяции изогенных клеток, и осуществления сцепления представляющих интерес амплифицированных нуклеотидных последовательностей. ! 2. Способ по п.1, в котором индивидуальную выделенную единичную клетку из популяции единичных клеток размножают до популяции изогенных клеток перед проведением амплификации и сцепления (стадия 1.c). ! 3. Способ по п.1, в котором клеточная фракция, содержащая лимфоциты, включает спленоциты, цельную кровь, костный мозг, мононуклеарные клетки или лейкоциты. ! 4. Способ по п.1, в котором клеточная фракция, содержащая лимфоциты, включает спленоциты или костный мозг, предпочтительно, спленоциты. !5. Способ по п.1, в котором клеточная фракция, содержащая лимфоциты, или линия B-лимфоцитов обогащена плазмацитами или плазмабластами. ! 6. Способ по п.1, в котором предс� |
