含89K毒力岛猪链球菌2型核酸的荧光检测试剂盒及方法

摘要

本发明提供了一种Taqman-MGB双重荧光探针PCR检测含89K毒力岛猪链球菌2型的基因快速检测试剂盒及检测方法。所述试剂盒的特异性扩增引物及特异性探针为：16S上游引物：5’-AGCGCAGGCGGTTTGA-3’；16S下游引物：5’-ACAGTTTCCAAAGCGTACTATGGTTA-3’；16S特异性探针：5’-FAM-AGTCTGAAGTAAAAGGC-MGB-3’；89K上游引物：5’-ATAAAAATACCGCTGTTGGATGGA-3’；89K下游引物：5’-CGTCTACACCGAATT GTTTTGCA-3’；89K特异性探针：5’-HEX-CATGGGAGATATAAAG AAC-MGB-3’；其中FAM、HEX为报告荧光基团，MGB为修饰基团。本发明方法取样方便简单，检测速度快，灵敏度高、结果准确，可用于SS2发病早期诊断。

主权项

一种含89K毒力岛基因猪链球菌2型核酸的Taqman‑MGB双重荧光探针PCR检测试剂盒，主要包括猪链球菌种特异性扩增引物及特异性探针、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物和DNA聚合酶，其特征在于：所述特异性扩增引物及特异性探针为：16S rRNA上游引物序列为：5’‑AGCGCAGGCGGTTTGA‑3’；16S rRNA下游引物序列为：5’‑ACAGTTTCCAAAGCGTACTATGGTTA‑3’；16S rRNA特异性探针序列为：5’‑FAM‑AGTCTGAAGTAAAAGGC‑MGB‑3’；89K上游引物序列为：5’‑ATAAAAATACCGCTGTTGGATGGA‑3’；89K下游引物序列为：5’‑CGTCTACACCGAATTGTTTTGCA‑3’；89K特异性探针序列为：5’‑HEX‑CATGGGAGATATAAAGAAC‑MGB‑3’；其中FAM、HEX为报告荧光基团，MGB为修饰基团。