表皮葡萄球菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开了表皮葡萄球菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法，该试剂盒由两对引物、DNA聚合酶、稳定液、反应液、样品预处理液、显色液和阳性对照液组成，以上七种液体分别置于容器中。本发明的基因快速诊断试剂盒应用六个区段，四条引物，根据是否扩增就能判断靶标物质的存在与否，因此具有高特异性。本发明的基因快速诊断试剂盒快速、高效、灵敏度高，只需一个恒定温度就能扩增反应，不需要特殊试剂与设备，检测成本低。本发明的基因快速诊断试剂盒鉴定简便，从dNTP析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的Mg2+结合，产生副产物—焦磷酸镁沉淀，可通过肉眼观察鉴定，并且加入显色液后，阴阳性结果显色差异显著，更加明显可靠。

主权项

一种表皮葡萄球菌基因快速诊断试剂盒，其特征在于由Bst DNA聚合酶、反应液、稳定液、样品预处理液、显色液和阳性对照液组成，以上五种液体分别置于容器中，反应液内两对引物为：外引物F3：CTAAAACWGCAACATTAGGAAAT；外引物B3：AGATACTTTGCTAGCAACTTGT；内引物FIP：AGCAGTGTTATAAACAACATCACCTTTTTTATTTAGTTGAAGACTACAATAGCG；内引物BIP：AARGCACCAGTAAAAGTGAATCATTTTTTTGGTGTACCCCAAGGA；每1L反应液中含有1.6～2mmol dNTP、20～25mmol Tris‑HCl、10～12.5mmol氯化钾、10～12.5mmol硫酸铵、8～10mmol硫酸镁、1～1.25ml TritonX‑100、0.8～1mol甜菜碱、内引物FIP/BIP各1.6～2mol和外引物F3/B3各0.2～0.25mol；每1L样品预处理液中含有10～20mmol pH 8.0的Tris‑HCl、1～2mmol EDTA和10～12ml Triton X‑100；上述阳性对照为表皮葡萄球菌基因组DNA。