一种利用生物反应器大规模生产流感病毒的方法

摘要

本发明提供了一种利用生物反应器进行大规模生产流感病毒的方法。包括(1)将传代细胞悬液接种于载体罐中，设定生物反应器的参数进行细胞吸附与培养过程。细胞吸附与培养过程使用含血清培养液进行；(2)待细胞生长至合适密度时，对细胞进行浸洗以去除血清成分，再将流感病毒液接种到载体罐中，设定生物反应器的参数进行病毒吸附与增殖过程。病毒吸附与增殖过程使用含TPCK胰酶的无血清培养液进行；(3)病毒液的收获。本发明的优点是，采用了潮汐式生物反应器，利用传代细胞繁殖流感病毒，可以获得高滴度的病毒液。本发明方法克服了传统转瓶培养及其它生物反应器的缺点，可以大规模连续生产高滴度病毒。

主权项

一种流感病毒的大规模生产方法，其特征在于，包括如下步骤：1)细胞的接种和吸附培养：将哺乳动物细胞接种到潮汐式生物反应器载体罐(8)内的载体(9)上，进行细胞的吸附培养；2)在细胞的吸附培养结束后进行细胞的扩增培养；3)将流感病毒接种到扩增培养的细胞上，进行病毒的吸附培养；4)在病毒的吸附培养结束后进行病毒的增殖培养；和5)在病毒含量达峰值后，收获含有流感病毒的培养液，其中步骤1)至4)中的培养在潮汐培养条件下进行，所述潮汐培养条件是通过泵出或泵入载体罐(8)内的培养液以间歇性淹没与暴露载体实现的。