| 发明名称 | 一种表达弹性蛋白酶2B的基因工程菌、其构建方法及应用 | ||
| 摘要 | 本发明提供了一种高效表达重组弹性蛋白酶2B的基因工程菌，其是通过反转录克隆了人肾脏组织中的弹性蛋白酶2B(elastase 2B，ELA2B)基因，构建原核重组表达质粒pET30a/ELA2B，转入到大肠杆菌中，从中筛选出高效分泌表达的菌株。该表达系统所表达的外源蛋白的N端具有His蛋白标签，通过Ni柱洗脱的方法进行纯化，极大地简化了重组蛋白的后续纯化工作，获得的重组蛋白纯度高达90％以上，且纯化效率高、成本低，适合目的蛋白的大规模制备。并且用该基因工程菌株发酵的重组弹性蛋白酶酶活可达408U/mL，比铜绿假单胞菌发酵产物高10倍。 | ||
| 申请公布号 | CN101974555A | 申请公布日期 | 2011.02.16 |
| 申请号 | CN201010258787.3 | 申请日期 | 2010.08.20 |
| 申请人 | 中国农业大学 | 发明人 | 黄昆仑;许文涛;罗云波;田洪涛;王海峰;谷欣晰;商颖 |
| 分类号 | C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/57(2006.01)I;C12N9/66(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N | 主分类号 | C12N15/70(2006.01)I |
| 代理机构 | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人 | 王朋飞;王加岭 |
| 主权项 | 含有ELA2B基因的表达载体，所述ELA2B基因具有Seq ID No：1所示的核苷酸序列。 | ||
| 地址 | 100193 北京市海淀区圆明园西路2号 | ||