以未成熟种子为外植体的月季再生植株的方法

摘要

本发明属于植物组织与细胞培养技术领域，具体涉及月季体细胞胚发生途径的植株再生方法。该方法包括三个培养阶段：(1)在诱导培养基上培养月季外植体，外植体为月季未成熟合子胚，从外植体上直接诱导体细胞胚；(2)体细胞胚接种到增殖培养基上增殖并促进其进一步分化；(3)增殖培养后的体细胞胚接种到体细胞胚成苗培养基上使其再生成完整植株。离体培养的月季的体细胞胚在植株再生过程中，根和芽同时发生，能形成完整植株，不需要进行生根培养。本发明的方法具有外植体来源广泛，取材方便等优点。所得到的体细胞胚是农杆菌介导的遗传转化的良好受体，本发明亦可用于月季遗传转化的研究。

主权项

一种将月季再生为完整植株的方法，它包括下列步骤：①以月季未成熟合子胚为外植体，将所述的外植体在诱导培养基中直接诱导出体细胞胚；②将步骤①中的体细胞胚接种到体细胞胚增殖培养基中增殖并使其进一步分化，得到成熟体细胞胚；③将步骤②得到的成熟体细胞胚接种到体细胞胚成苗培养基中再生为完整植株；其中所述的诱导培养基的组成如下：1/2MS基本培养基，2，4‑二氯苯氧乙酸0‑3.0mg/L，6‑苄基腺嘌呤0‑1.0mg/L，葡萄糖30g/L，植物凝胶2.5g/L；所述的体细胞胚增殖培养基的组成如下：MS基本培养基，2，4‑二氯苯氧乙酸1.0mg/L，6‑苄基腺嘌呤0.05mg/L，葡萄糖60g/L，植物凝胶2.5g/L；所述的体细胞胚成苗培养基的组成如下：MS基本培养基，6‑苄基腺嘌呤0‑1.0mg/L，葡萄糖30g/L，植物凝胶2.5g/L或MS基本培养基，唑重氮苯茎脲(TDZ)1.0mg/L，6‑苄基腺嘌呤0.5mg/L，葡萄糖30g/L，植物凝胶2.5g/L。