发明名称 一种鸡α干扰素的生产方法及构建的工程菌
摘要 本发明提供了一种鸡α干扰素的生产方法及其构建的工程菌,其工艺过程为:首先将获得细菌信号肽L-天(门)冬酰胺酶II基因序列插入携带鸡α干扰素成熟蛋白基因序列的pET-28a(+)载体中,得到能够分泌表达鸡α干扰素的工程菌;再在LB培养液中,37℃,200rpm培养4~8h,加IPTG至终浓度为1mmol/L,37℃,180rpm继续培养2~6h;所得菌液经进一步分离处理得到鸡α干扰素产品。本发明还提供了一种能够分泌表达鸡α干扰素的工程菌,其分泌表达的过程为:首先通过PCR获得编码鸡α干扰素成熟蛋白和细菌信号肽L-天(门)冬酰胺酶II的基因序列,连接在pET28a(+)的多克隆位点的下游,构建出表达质粒;再将其转化到基因工程大肠杆菌表达细菌中,在常规的培养液中诱导表达。
申请公布号 CN101948890A 申请公布日期 2011.01.19
申请号 CN201010187706.5 申请日期 2010.06.01
申请人 宁夏大学 发明人 周学章;宋振威;贾芳;王玉炯
分类号 C12P21/00(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 主分类号 C12P21/00(2006.01)I
代理机构 宁夏专利服务中心 64100 代理人 叶学军
主权项 一种鸡α干扰素的生产方法,其工艺过程为:首先将获得细菌信号肽L‑天(门)冬酰胺酶Ⅱ基因序列插入携带鸡α干扰素成熟蛋白基因序列的pET‑28a(+)载体中,得到能够分泌表达鸡α干扰素的工程菌;再在LB培养液中,37℃,200rpm培养4~8h,加IPTG至终浓度为1mmol/L,37℃,180rpm继续培养2~6h;所得菌液经进一步分离处理得到鸡α干扰素产品。
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