一种快速检测藻类细胞沉降速度的方法

摘要

本发明涉及一种快速检测藻类细胞沉降速度的方法，包括：采用已知浓度及相应颗粒数量的标定溶液标定显微镜物镜对应的虚拟采样容积和虚拟采样容积高度：取处于对数生长期的藻细胞溶液，进行离心重悬；以等倍率连续稀释b步骤得到的藻细胞溶液，获得多个样品；用倒置显微镜对载有藻细胞溶液的各孔的底部进行成像观察，选择作为检测沉降速度的沉降柱；对沉降柱以间隔相等时间，对沉降柱底部连续成像获取多幅图像；采用数字图像分析方法计算得到每幅图像中藻细胞的数量；采用线性回归方法分析藻细胞数量与沉降时间的对应关系，并利用标定的虚拟采样容积高度即可计算出藻细胞的沉降速度。本发明具有方法装置简单、经济实用、检测精度高、操作简便等优点。

主权项

1.一种快速检测藻类细胞沉降速度的方法，其特征在于，包括以下步骤：a、采用已知C₀浓度及相应颗粒数量的标定溶液标定显微镜物镜对应的虚拟采样容积和虚拟采样容积高度ΔH：其中虚拟采样容积的底面积S为：虚拟采样容积高度ΔH为：ΔH＝K₁/C₀S；式中K₁对应通过线性回归方法确定的虚拟采样容积内C₀浓度的标定溶液内颗粒的数量；b、用离心管取处于对数生长期的藻细胞溶液，使用低速离心机进行离心重悬；c、以等倍率连续稀释b步骤得到的藻细胞溶液，获得不小于三个样品，分别置于24孔板中的连续数个孔中；d、用倒置显微镜对载有藻细胞溶液的各孔进行成像观察，成像观察位置为孔的底部，选择物镜视场内初始细胞数量为50-200个的孔作为检测沉降速度的沉降柱；e、对沉降柱以间隔相等时间，对沉降柱底部连续成像3次以上，共获取3幅以上图像；f、基于e步获取的图像，采用数字图像分析方法计算得到每幅图像中藻细胞的数量；g、基于f步计算的藻细胞的数量，采用线性回归方法分析藻细胞数量与沉降时间的对应关系，并将a步中标定的虚拟采样容积高度ΔH代入即可计算出藻细胞的沉降速度为：V_a＝K₂ΔH/b₂，式中K₂和b₂分别是通过线性回归方法确定的虚拟采样容积内单位时间增加藻细胞数量和时间t＝0时刻藻细胞数量(即初始细胞数量)。