用基因工程技术生产重组嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus halodurans XJU-1)乙醛脱氢酶的方法

摘要

本发明公开了一种利用基因工程技术生产重组嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus haloduransXJU-1)乙醛脱氢酶的方法，内容包括克隆嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus halodurans XJU-1)乙醛脱氢酶aldA和aldB基因片段；其基因片段分别与pET30b(+)表达载体重组，构建pET30b(+)-aldA和pET30b(+)-aldB重组载体；重组载体分别转化大肠杆菌BL21(DE3)后，经卡那霉素筛选，分别获得表达乙醛脱氢酶aldA和aldB的BL21(DE3)工程菌；表达乙醛脱氢酶的BL21(DE3)工程菌在LB培养基扩大培养，从发酵液提取、分离得到乙醛脱氢酶粗酶液。

主权项

一种利用基因工程技术生产重组嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus halodurans XJU‑1)乙醛脱氢酶的方法，其特征包括如下步骤：A.克隆嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus halodurans XJU‑1)乙醛脱氢酶aldA和aldB基因片段；B.嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus halodurans XJU‑1)乙醛脱氢酶aldA和aldB基因片段分别与pET30b(+)表达载体重组，构成pET30b(+)‑aldA和pET30b(+)‑aldB重组载体；C.pET30b(+)‑aldA和pET30b(+)‑aldB重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后，经卡那霉素筛选，获得表达乙醛脱氢酶的BL21(DE3)工程菌；D.表达乙醛脱氢酶的BL21(DE3)工程菌在LB培养基培养，经种子及发酵扩大培养，从发酵液提取、分离得到乙醛脱氢酶粗酶液。