发明名称 |
大肠埃希氏菌K88、K99、987P纤毛亚单位油乳剂疫苗的生产方法 |
摘要 |
本发明涉及一种是用于预防仔猪黄痢的大肠埃希氏菌K88、K99、987P纤毛亚单位油乳剂疫苗的生产方法,本发明是用分别生长K88、K99、987P纤毛抗原的大肠埃希氏菌,接种于适宜培养基培养,提取生长于菌体表面的纤毛抗原,与油佐剂混合乳化制成。用于预防由大肠埃希氏菌引起的新生仔猪腹泻病(即仔猪黄痢)。本发明采用新型设备和新的工艺参数,实现了三种纤毛抗原的高效、快速提取,免疫效力比普通铝胶佐剂疫苗高3~5倍。 |
申请公布号 |
CN101450206B |
申请公布日期 |
2011.01.12 |
申请号 |
CN200910000732.X |
申请日期 |
2009.01.09 |
申请人 |
青岛易邦生物工程有限公司 |
发明人 |
郭玉广;孙健;李明义;范根成;杜元钊;胡潇 |
分类号 |
A61K39/108(2006.01)I;A61P31/04(2006.01)I |
主分类号 |
A61K39/108(2006.01)I |
代理机构 |
北京君智知识产权代理事务所 11305 |
代理人 |
郑明 |
主权项 |
一种预防仔猪黄痢的K88、K99、987P纤毛亚单位疫苗的生产方法,其特征在于包括以下几个步骤:1)按发酵罐容积70%(V/V)加入改良Minca液体培养基,同时按培养基0.1%(V/V)加入消泡剂,通入高温蒸汽灭菌30min,待培养基温度降至35~37℃,按3%(V/V)向发酵罐中加入种子培养物,调节培养温度至37℃,调节融氧浓度至35%,培养5~7h分别制备含K88纤毛抗原的大肠埃希氏菌C83549菌株的菌液、含K99纤毛抗原的大肠埃希氏菌C83644菌株的菌液和含987P纤毛抗原的大肠埃希氏菌C83710菌株的菌液;2)各菌株发酵培养菌液经管式离心机10000r/min离心30min,收获的菌泥按0.1g/ml比例重新悬浮于生理盐水中,采用剪切机对在58~65℃对含不同纤毛抗原的大肠埃希氏菌的菌悬液按5000~6000r/min的剪切强度剪切20~25min分别进行各纤毛抗原的提取;3)按每1ml成品苗中,K88纤毛抗原含量≥100个抗原单位、K99纤毛抗原含量≥50个抗原单位、987P纤毛抗原含量≥50个抗原单位,配制混合纤毛液;4)按常规方法制备成油乳剂疫苗。 |
地址 |
266032 山东省青岛市南京路369号 |