小鼠裸卵体外成熟技术

摘要

本发明涉及一种小鼠裸卵体外成熟技术，属于生物技术领域。本发明为卵丘细胞利用胱氨酸和半胱胺提高了小鼠裸卵GSH合成和发育能力，进而建立了卵丘细胞共培养结合添加半胱胺和胱氨酸使小鼠裸卵完全恢复发育能力的体外成熟系统。小鼠裸卵在添加100-200μmol/l半胱胺和250-300μmol/l胱氨酸的TCM-199成熟培养液中与小鼠或山羊卵丘细胞共培养，其囊胚率达到添加相同巯基化合物培养成熟COC水平。将共培养成熟的裸卵和COC产生的2-细胞胚胎移植后，妊娠率和产仔数差异不显著。这是在国际上首次建立使小鼠裸卵完全恢复发育能力的体外成熟系统，对于动物胚胎工程以及人类辅助生殖技术研究和应用都有重要意义。

主权项

一种小鼠裸卵体外成熟的方法，其特征在于把小鼠裸卵与小鼠或山羊卵丘颗粒细胞置于添加有半胱胺和胱氨酸的TCM 199成熟培养液中共培养，半胱胺最终使用浓度为100 200μmol/l，胱氨酸最终使用浓度为250 300μmol/l。