提取琵琶甲中抑菌物质、水溶性多糖和甲壳素的方法

摘要

本发明涉及一种从琵琶甲中提取抑菌物质、水溶性多糖及甲壳素的方法，以琵琶甲成虫为原料，烘干、粉碎后用脱脂剂脱脂，溶剂及水依次提取，得溶剂提抑菌物和水提抑菌物；再用溶剂和水超声波提取，得水溶性琵琶甲多糖，然后微波加热水解脱除蛋白、酸液脱无机盐，得到琵琶甲甲壳素。所提抑菌物对细菌具有一定抑菌能力，所得水溶性琵琶甲多糖具有提高免疫效果，得到的琵琶甲甲壳素灰分低、纯度高。在本发明中利用不同极性的溶剂实现对琵琶甲中抑菌物质、水溶性多糖及甲壳素的提取。工艺简单，操作方便，最大程度综合利用资源，实现对琵琶甲所含各种活性成分的利用，还能减少环境污染，减低产品成本，增加企业效益。

主权项

一种提取琵琶甲中抑菌物质、水溶性多糖及甲壳素的方法，其特征在于包括以下步骤：A、按琵琶甲∶脱脂溶剂＝1∶2～6的质量比，在琵琶甲中加入脱脂溶剂，搅拌混匀，室温下静置脱脂18～26小时，过滤分离得滤液和脱脂滤渣，滤液在温度为25～40℃、真空度为0.1MP条件下，浓缩回收脱脂溶剂后得提取物；脱脂滤渣于室温下自然晾干；B、在上述脱脂滤渣中，按脱脂滤渣∶溶剂＝1∶2～6的质量比加入溶剂，搅拌混匀，室温下浸渍12～24小时后过滤得滤液和滤渣，在滤渣中再加入相同质量比的溶剂，搅拌混匀，室温下浸渍12～24小时后过滤得滤液和滤渣，如此重复浸提至少3次，合并滤液，浓缩回收溶剂后，得提取的琵琶甲抑菌物；滤渣于室温下自然晾干；C、在上述B步骤的滤渣中，按滤渣∶水＝1∶4～10的质量比加水，室温下超声波提取1小时，过滤得滤液和滤渣，滤液浓缩、干燥后得提取的琵琶甲水提抑菌物；滤渣于室温下自然晾干；D、在上述C步骤的滤渣中，按滤渣∶水＝1∶4～20的质量比加水，50～100℃温度下，超声波提取0.5～2小时，离心分离出液体和固体渣，在固体渣中加水至没过固体渣，重复在50～100℃温度下，超声波提取0.5～2小时，离心分离出液体和固体渣，如此重复提取2～4次，合并各次液体，经过滤后，将滤液浓缩至原体积的1/10，得浓缩液；E、在上述D步骤的浓缩液中，按浓缩液∶乙醇＝1∶4～5的体积比加入质量浓度为95％的乙醇静置20～26小时，以沉淀多糖，离心分离得液体和沉淀物，在液体中重复加入相同量的乙醇再次沉淀，如此反复沉淀三次，得液体和沉淀物；在沉淀物中，按沉淀物∶水＝1∶2～5的质量比加水溶解，离心分离去除不溶物得液体；合并各次液体，经浓缩、干燥后，得提取的琵琶甲水溶性多糖；F、在D步骤分离出的固体渣中，按固体渣∶溶剂＝1∶5～10的质量比加入质量浓度为1～15％的溶剂，加热至50～90℃温度，过滤分离出滤液和滤渣，滤渣经水洗至中性后甩干水份，按滤渣∶脱盐剂＝1∶10～15的质量比，在滤渣中加入浓度为0.1～2mol/L的盐酸溶液，室温下反应5～100分钟脱除无机盐，过滤得滤液和滤渣，滤渣经水洗至中性后，干燥，得提取的琵琶甲甲壳素。