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Un método de purificación de adenovirus de una preparación viral, que comprende las etapas sucesivas de: a) someter la preparación viral a cromatografía de intercambio aniónico, en la que el adenovirus se eluye de un medio cromatográfico de intercambio aniónico; y b) someter el eluato de la etapa a) que contiene el adenovirus a cromatografía de exclusión por tamaño, donde el adenovirus se eluye de un medio cromatográfico de exclusión por tamaño, donde el medio cromatográfico de intercambio aniónico y/o el medio cromatográfico de exclusión por tamaño se pone en contacto con un tampón que comprende sacarosa al 2-16%.
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